靶向抗肿瘤药物传递系统的制备与表征.pdfVIP

第29卷第12期 宿州学院学报 V01．29，NO．12 ofSuzhou Dec．20l 4 2014年12月 Journal University doi：10．3969／j．issn．1673—2006．2014．12．025 靶向抗肿瘤药物传递系统的制备与表征 单玲玲，高贵珍，曹稳根，吴 超，陈红玲 宿州学院生物与食品工程学院，药物生物技术研究所，安徽宿州，234000 摘要：紫杉醇作为抗恶性肿瘤临床药物具有较好的疗效，但由于紫杉醇具有结构复杂、难溶于水、生物利用度差等 缺点．限制了其在临床上的应用。本实验将多种肿瘤细胞表面高表达受体的转铁蛋白作为药物传递系统“导向基 团”，以精氨酸为连接转铁蛋白与紫杉醇药物的Linker．并用荧光染料FITC标记紫杉醇前药，制备荧光标记的转 光光度法及SDS电泳进行表征．并用LPSA对制备的药物传递系统进行粒径大小的考察，实验结果证明已成功制 备荧光标记的靶向抗肿瘤药物传递系统，且转铁蛋白在修饰前后其粒径大小没有明显的变化。 关键词：转铁蛋白；紫杉醇；荧光标记；表征 中图分类号：R914．2文献标识码：A 文章编号：1673—2006(2014)12一0085一03 恶性肿瘤严重威胁着人类的生命健康，肿瘤的 随着分子影像学在肿瘤临床医学上的快速发 早期诊断与有效治疗是当前亟待解决的问题。临床 展，众多新型分子影像技术被研发出来，其中最引人 一线抗癌化学药多数为细胞毒性药物，存在药物剂 注目的是利用荧光标记技术制备出不同探针应用于 量一疗效依赖性，以增加剂量达到较好的药物疗效， 肿瘤的早期诊断[7]，监测体内分子的行为，成像运用 这样加重了药物毒性反应，也限制药物的临床应 的范围从细胞、组织发展到全身水平。荧光染料的种 用口]。因此，如何利用靶向性药物传递系统提高抗肿 类繁多，常用的荧光染料有异硫氰酸荧光素 瘤化学药物的局部浓度，减小全身毒副作用，一直是 研究者的热门话题。 等，本实验选用FITC作为标记靶向抗肿瘤药物传 递系统的荧光染料，为进一步研究药物传递系统在 转铁蛋白(Transferrin，Tf)是一种结合铁的p 一球蛋白，存在于脊椎动物体液及细胞中，包括血清 体内的代谢途径提供实验平台。 转铁蛋白、卵转铁蛋白和乳转铁蛋白三种类型，其中 本实验以转铁蛋白配体作为药物传递系统“导 血清所含转铁蛋白含量最多。血清转铁蛋白含有 向基团”，用精氨酸连接转铁蛋白与紫杉醇，并用荧 679个氨基酸残基，这为修饰蛋白表面提供众多的 光染料FITC标记紫杉醇前药，制备荧光标记的靶 活性位点。转铁蛋白受体(Transferrinreceptor，向抗肿瘤药物传递系统。采用TI。C在反应过程中示 TfR)作为一种跨膜糖蛋白，在多种恶性肿瘤细胞表踪，LC—MS分子量鉴定，用紫外分光光度法初步鉴 面(如乳腺癌、膀胱癌、肝癌、肺癌等细胞)都有高表 定此药物传递系统的合成，用SDS电泳法证明其结 达[2‘3]，且恶性肿瘤细胞表面转铁蛋白受体与配体的 构的组成，使用LPSA研究转铁蛋白修饰前与修饰 亲和力是正常细胞的10～100倍[4]，因此，可利用转后粒径大小的变化，为下一步的细胞和动物实验打 铁蛋白受体一配体的介导，将药物靶向传递到肿瘤 下基础。 部位，以提高药物局部浓度，降低药物的毒性。如 1 实验部分 Yeh等采用Schiff碱将转铁蛋白与抗肿瘤药物阿霉 素结合，实验结果证明此药物传递系统可靶向性杀 1．1试剂与仪器 死白血病肿瘤细胞而对正常血细胞无毒性[5]。还有 血清转铁蛋白、紫杉醇、精氨酸、荧光染料FITC 一些研究者