火龙果MSAP体系的优化和组培苗DNA甲基化检测.PDFVIP

( ) 第 卷第 期 西 南 大 学 学报 自然科学版 年 月 38 9 2016 9 ( ) Vol.38 No.9 JournalofSouthwestUniversit NaturalScienceEdition Se. 2016 y p : / DOI 10.13718 .cnki.xdzk.2016.09.006 j 火龙果MSAP体系的优化及 组培苗DNA甲基化检测① 1 1 2 刘鹏飞 , 乔 光 , 刘 涛 , 2 2 1 彭志军 , 蔡永强 , 文晓鹏 , ; 1.贵州大学 农业生物工程研究院山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室 贵阳 550025 , 2.贵州省果树科学研究所 贵阳 550006 : , , , 摘要 以火龙果组培苗为材料 采用正交实验设计 优化了适用于火龙果的 体系 结果表明 基因组 MSAP . DNA , / , ; , 约 采用 和 两步酶切法 酶切较充分 使用 预扩增体系 含酶连产 300ng EcoRI10U Ms IH aII2.5U 20 L p p μ 物 , ,上下游引物 / 各 ;选择性扩增反应体系 ,含稀释 倍的预扩增 1.0 L Mix10 L E+A HM+T 2.0 L 20 L 50 μ μ μ μ , , / , 产物 上下游引物 各 选用 对引物检测发现 组培苗 位 3.0 L Mix5 L E+ANN HM+TNN 2.0 L. 17 CCGG μ μ μ , ,