微生物标本采集技术临床环镜空气_培训课件.pptVIP

撞击式空气微生物采样法 采样器分别置于室内对角和中央共3个点。设置采样时间为每点2min，空气流量为28.5l／min，细菌培养方法同沉降法。 FA-1型多级撞击式空气微生物采样器 整个仪器是由采样器以及抽气泵、流量计、玻璃平皿所组成。 采样器是6层有微小孔眼的铝合金圆盘。圆盘下放琼脂平皿，每圆盘间有密封胶圈，在通过三个弹簧卡子把圆盘牢固地联在一起。每个圆盘上有400个成环行排列、逐层减小、尺寸精确的小孔，标准采样流量为1立方呎（28.3L/min）。 浮游菌测定法优点 1、能够采集浮游在空气中的微生物粒子，这种粒子可随人们呼吸运动进入呼吸道内，因而具有卫生学意义。 2、采样效率高，采样量准确，采样时不受粒经大小、沉降速度和气流影响，能准确的表示出空气中细菌的实际含量。 使用中消毒液的监测: 采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管吸取0.5mL被检样液，加入4.5mL含相应中和剂的稀释液中混匀，对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可； 在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml被检样液，加入9ml稀释液中混均。 醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可； 含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需在肉汤中加入0．1％硫代硫酸钠； 洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在肉汤中加3％（W/V）吐温80和0.3%卵磷脂； 醛类消毒剂，需在肉汤中加入0.3％甘氨酸； 含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需在肉汤中加入3％（ W/V）吐温80，以中和被检药液的残效作用 医疗器械灭菌效果的监测: 一般采用无菌试验法，但因其操作繁锁，监测周期较长以及受抽样量大等因素的限制，故一般情况下可采用常规监测法评价医疗器械灭菌效果。 1．采样时间：灭菌后，效期内 2．采样方法： * 小件物品：直接放入5ML无菌洗脱液内，立即送检。  * 对手术钳、镊子等大的医疗器械在无菌操作下取2份以上用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂擦采样，并将棉拭子投入5mL无菌洗脱液中； * 对一些特殊医疗用品，可用浸有无菌洗脱液采样液的棉拭子在被检物体表面涂擦采样，被采表面＜100cm2，取全部表面，被采表面≥100cm2，取100cm2；采样后马上送检。 * * * * * * * * * * 粪便标本采集 自然排便后，取有脓血、粘液、组织碎片部分 粪便1～3g。 液体粪便则取絮状物，一般取1～3ml，直接装入粪便容器或保存液或运送培养基中送检。 直肠拭子法 将肛门周围洗净，然后用一根浸过无菌生理盐水的棉拭子，插入肛门约５mm-2cm处，轻轻旋转，使之与直肠黏膜表面接触，然后取出置于无菌试管中立刻送至微生物室．本法只适用于排便困难患者或婴幼儿，不推荐使用拭子做常规性病原菌培养。 环境采样 有关采样 ?采样方法：采样是决定结果的第一要素！ ?采样时间：查问题时以提高检出率为原则。 ?培养基：质量问题影响检出率！关注！ ?检测条件：注意实验室污染。 ?培养条件：注意培养温度、培养时间。 ?结果报告：不能零报，报方法最小检出单位。 ?应该让懂院感知识的检验人员来采样会更好！ ?阳性检出率越高说明检测水平越高 美国的理念 1970年以前，美国的医院定期对空气和环境表面（如，地面、墙壁、台面）进行培养 。到了 1970年，CDC 和美国医院协会（AHA）主张停止对环境的常规培养，因为医院感染发生率与空气或环境表面中总的微生物污染水平不相关，且环境表面或空气中微生物含量的允许水平也没有有意义的标准 。1970-1975 年，美国有 25%的医院减少了这种常规的环境培养工作——一个已经持续的趋势 。 什么情况下要求进行环境采样 四种状况下要求进行环境采样一是当环境中的宿主或媒介物被认为在疾病传播中有流行病学意义时，提供疾病或感染暴发的依据 。第二种情况是在研究过程中进行适当的环境采样。第三种情况是为了监测潜在的危险环境条件，确认有害的化学或生物因素的存在，并验证危险因素的成功消除。第四种情况是为了质量保证（QA）而采样，以评估改变感染控制措施取得的效果或是确保设施或系统按照规范和预期结果执行。 物体表面采样 物体表面细菌总数的检测是评价 被污染程度 消毒效果 主要依据 物体表面采样--涂抹法 涂抹法：将5 cm×5 cm的标准灭菌规格板， 放在被检测物品表面，用浸有无菌生理盐水的棉拭子在规格板内来回均匀涂抹整个方格，并随之转动棉拭子，剪去手接触部分后，将棉拭子放入盛有10 ml生理盐水的试管中，充分振摇1min，作适量稀释后，接种于普通营养琼脂平板上进行计数，然后根据平板上菌落数得出物品表面每平方厘米的细菌数 物体表面采样--斑贴法 斑贴法:按无菌操作方法将5 cm×5 cm的无菌滤纸用灭菌生理盐水浸湿，均匀