第4章胚胎培养研讨.ppt

第4章 胚胎培养 第4章 胚胎培养(3学时) 本章教学目的与要求 (1)掌握胚培养和胚乳培养的操作步骤； (2)了解胚珠培养和子房培养的操作步骤。 ①克服远缘杂种的不育性， ②使胚胎发育不完全的植株获得后代， ③缩短育种年限，提高育种效率。 种子的结构 第一节、胚培养 胚培养：采用人工的方法将胚从种子、子房或胚珠中分离出来，再放在无菌的条件下，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程。 二、培养过程： 1、幼胚培养过程： 取子房 常规表面消毒 解剖镜下，取胚珠、去珠被、取出完整幼胚。 固体培养 幼胚的发育方式： 1）胚性发育； 2）早熟发育； 3）产生愈伤组织 2、成熟胚培养过程---以玉米成熟胚培养为例 1）玉米种子消毒 2）在黑暗条件下，将种子放在无菌湿润的含滤纸的培养皿中培育6hr。 3）将吸涨的种子在无菌培养皿内将胚分离出来 4）无菌水冲洗3次 5）在MS培养基中暗培养。 6）观察：2d出现胚根，3-4 d出现胚芽，10d长成幼苗。 三、培养基与培养条件 1、培养基 2、培养条件： 1）糖类： 2）附加成分 3）光照 4）培养方式： 幼胚培养适于液体培养， 成熟胚适于固体培养 四、胚培养的应用 1)在远缘杂交育种中:克服杂种胚不能正常发育 2)克服珠心胚的干扰,提高育种效率 3)缩短育种周期 4)测定休眠种子的萌发率 5)理论研究中的应用 第二节、胚乳培养 胚乳外植体制备:种子消毒---取出胚乳 培养:White或MS诱导培养基---25-27℃--暗或弱光 发育:诱导形成愈伤组织----再分化形成胚状体或不定芽---生根培养----植株。 胚乳植株染色体数目的检查 取根尖、幼叶或愈伤组织 0.2%-0.5%秋水仙素碱溶液在25℃浸泡4-8hr 流水冲洗5-10min 卡诺氏液或FAA液固定 1mol盐酸，60 ℃水浴8-10min 染色、压片、镜检、计数 二、培养基与培养条件 三、胚乳再生植株的染色体倍数 稳定型：三倍体 畸变型：除少数是三倍体，多数是由多种倍性细胞组成的嵌合体 四、胚乳培养的应用 1、胚乳培养可得到三倍体植株，产生无籽果实。或加倍形成六倍体植株进行育种。 2、胚乳培养可得到倍性不同的愈伤组织，可分离和筛选各种类型的非整倍体植株。 第三节 胚珠和子房培养 一、胚珠培养 定义：是指将胚珠从母体上分离出来，在无菌的人工环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。 胚珠培养类型： （二）、培养基：White,Nitsch,MS 二、子房培养 定义：子房培养是指将子房从母体上分离出来，在无菌的人工环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。 （一）子房培养的培养过程 1、制备外植体：在开花前后适宜时期取子房或幼花，消毒 2、子房培养：固体或液体培养均可 性细胞（卵细胞、助细胞、极核、反足细胞）----胚状体或愈伤组织----单倍体植株； 体细胞（珠被、子房壁）---胚状体或愈伤组织----二倍体植株； 三、胚珠和子房培养的应用 （二）子房培养的应用 1、授粉子房培养目的：挽救杂种胚 2、未授粉子房培养目的：获得单倍体植株。 本章小结： (1)胚胎培养包括：幼胚培养、成熟胚培养、胚珠培养、子房培养和胚乳培养等。 (2)胚胎培养的意义。 (3)离体胚培养方法：成熟胚和幼胚培养。 (4)未成熟胚培养，三种不同的生长方式，胚性发育；早熟萌发；形成愈伤组织。 (5)胚培养的作用。 (6)检查胚珠植株的染色体数目的方法。 (7)分析胚珠培养和子房培养的发育途径。 * * 大 家 好 ！ 植物组织培养 胚胎培养是指将植物的胚胎与母体分离，培养在人工的培养基上形成幼苗的过程，包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。 第4章 胚胎培养 胚培养 胚乳培养 胚珠和子房培养 本章内容 第4章 胚胎培养 第4章 胚胎培养 胚胎培养的意义： 胚的发育 第4章 胚胎培养 第4章 胚胎培养 一、培养类型 1、幼胚培养 2、成熟胚培养 第一节、胚培养 玉米成熟胚的培养 第一节、胚培养 第一节、胚培养 第一节、胚培养 胚乳培养是指将胚乳从母体上分离出来，在无菌的环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。 第4章 胚胎培养 一、胚乳培养过程 第二节、胚乳培养 胚乳培养过程 胚乳 胚状体发育成苗 不定芽苗 愈伤组织 形态发生 第二节、胚乳培养 第二节、胚乳培养 培养基 培养条件 第二节、胚乳培养 第二节、胚乳培养 第二节、胚乳培养 第4章 胚胎培养 倒生胚珠 1、受精胚珠的培养 2、未受精胚珠的培养 示胚珠的位置 第三节 胚珠和子房培养 （三）、胚珠的发育： A