第三章 紫外可见光谱法2整理.ppt

四、定量测定的条件选择 1. 显色反应(显色剂)及显色条件的选择 2. 吸光度测定条件的选择 （1）显色反应的选择 显色反应主要分为两大类，即络合反应和氧化还原反应，最主要是络合反应。 (a)灵敏度高：ε的大小是显色反应灵敏度高低的重要标志，要求显色反应的ε应足够大，一般而言，当εmax≥104时，可以认为该反应的灵敏度较高。 (b)选择性好：是指显色剂仅与一个组分或少数几个组分发生显色反应。主要是指干扰较少或干扰易于消除的显色反应。 例如：分析Al制品中的Zn含量，用“茜素络合剂”作为显色剂, 二者都反应，但加入NH4F后，Al3+与F-形成更稳定的AlF63-配合物，而Zn2+不与F-反应，这样就消除了Al3+的干扰，选择性的测定了其中的Zn2+含量。 (c) 显色剂本身在测定波长处无明显吸收 这样，试剂空白值小，可以提高测定的准确度和灵敏度。 通常把显色剂和有色化合物这两种有色物质最大吸收波长之差称为“对比度”。 一般要求显色剂和有色化合物的对比度Δλ在60nm以上。 (d) 反应生成的有色化合物组成恒定，化学性质稳定 这是为了保证在测定过程中吸光度基本保持不变，否则会影响吸光度测定的准确度及再现性。 （2）显色条件的选择 分光光度法是测定显色反应达到平衡后溶液的吸光度，要得到准确的结果，必须从研究反应平衡着手，了解影响显色反应的因素，控制适当的条件，使显色反应完全和稳定。 影响显色反应的主要因素包括： ●显色剂用量 ●溶液酸度 ●显色温度 ●显色时间 ●干扰的消除 (a)显色剂用量 显色剂的适宜用量常通过实验确定：固定待测组分的浓度和其它条件，只改变显色剂的加入量，分别测定吸光度，绘制A-cR 关系曲线，一般有三种情况，如p403，图10-46所示。 浅红 橙红 浅红 (b)溶液酸度 酸度对显色反应的影响是多方面的。 M + +HR=MR+H+ * 影响显色剂的平衡浓度和颜色 * 影响被测金属离子的存在状态 * 影响络合物的组成 由吸光度与pH关系曲线确定pH范围，选择曲线平坦且吸光度高的部分对应的pH范围。 (c)显色温度 一般在室温下进行。有时可通过加热，以加速显色反应，使反应完全。温度每升高10℃，反应速度可提高2～3倍。 有些反应加热会使生成的络合物又发生分解，所以合适的反应温度应由实验确定，作A ～T/℃曲线。 (e)干扰的消除 光度分析中，共存离子的干扰是很常见的，如干扰离子本身有颜色，或与显色剂反应也生成有色化合物，都将干扰测定。消除共存离子干扰的方法有： 加入掩蔽剂，使干扰离子生成无色配合物或无色离子。 例如：Co2+与NH4SCN反应显色，干扰离子Fe3+——F-掩蔽，Bi3+——EDTA掩蔽。 选择适当地显色条件，如酸度、显色剂等。 例如：二苯硫棕测定Hg2+时，Cu2+、Co2+、Ni2+、Sn2+、Zn2+、Pb2+、Bi3+等多种离子都干扰，但在稀酸介质（0.5mol/L H2SO4)，就无干扰。 分离除去干扰离子 在不能掩蔽的情况下，可采用沉淀、离子交换、溶剂萃取等分离方法除去干扰离子。 例如测钙，Fe3+干扰，可以通过沉淀除去。 利用氧化还原反应，改变干扰离子的价态 例如Co2+与NH4SCN反应显色，Fe3+对测定有干扰时，加入抗坏血酸或盐酸羟胺还原为Fe2+，就不会SCN-反应。 2.吸光度测定条件的选择 例 丁二酮肟光度法测钢中镍， 络合物丁二酮肟镍的最大吸收 波长为470 nm，但试样中的铁 用酒石酸钠掩蔽后，在470 nm 处也有一定吸收，干扰镍的测 定。为避免铁的干扰，可以选 择波长 520 nm进行测定，虽然 测镍的灵敏度有所降低，但酒 石酸铁不再干扰镍的测定。 （2）参比溶液的选择 利用参比溶液来调节仪器的零点，可消除 由吸收池壁及溶剂对入射光的反射和吸收等带 来的误差，扣除干扰的影响。 方法：首先，采用另一光学性质相同，厚度相 同的比色皿贮参比溶液，调节仪器使透过参比 溶液的透光率为100%，吸光度为零，消除非正 常吸收的各种因素。然后，再测定试液的吸光 度A，扣除了非正常吸收的各种因素。 参比溶液的选择原则： （a）如果仅待测物（生成物）在测定波长处有吸收，可用