HPLC法测定苦玄参中苦玄参苷IA的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定苦玄参中苦玄参苷IA的含量论文 .freel，4.6×250mm)，乙腈-0.3%磷酸(34∶66)为流动相.freell/min，检测波长为264nm。结果 苦玄参苷IA进样量在0.42～2.10μg的范围内呈良好的线性关系，r=0.9999，平均回收率为100.4%，RSD=1.64%（n=6）。结论 该法操作简便、准确、专属性强，可作为苦玄参药材中苦玄参苷IA的质量控制方法。 【关键词】 苦玄参；苦玄参苷IA；含量测定；高效液相色谱法 【Abstract】 Objective To establish a method for the determination in picria fel-terrae Lour.Methods RP-HPLC.The piefeltarraeninIA n(5μm，4.6×250mm) and detected at 264nm and 1ml/min，using acetonitrile-0.3%phosphoric acid (34∶66) as the mobile phase. Results PiefeltarraeninIA in picria felterrae Lour ined.The linearity rangs ethod is simple， accurate and ain constituient piefeltarraeninIA in picria felterrae Lour. 【Key ination； high performance liquid chromatography(HPLC) 苦玄参Picria fel-terrae Lour.为玄参科苦玄参属唯一的一种植物，主要分布于广西、广东及云南等地。其作为广西民间用药已有二百多年历史，具有清热解毒，凉血消肿之功效，用于治疗感冒风热、咽喉肿痛、痄腮、胃热腹痛、痢疾、跌打损伤、毒蛇咬伤及痈疖等［1］，因其味极苦，别名又称苦草。 苦玄参是广西民间常用药，2005年版《中国药典》正文中尚未收载该品种，但有些以其为原料的中成药如妇炎净胶囊等已收载入《中国药典》（2000年版及2005年版）［2］。对苦玄参药材及其中成药中苦玄参苷IA含量的测定已有相关报道［3～6］，但均采用薄层扫描法测定，本文则采用HPLC法对不同产地、不同采收季节苦玄参中苦玄参苷IA进行含量测定，现报道如下。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Agilent 1100 高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）：GB15B-DAD二极管阵列检测器，G1314A-Villipore simplicity-185超纯水器（美国密理博公司）；SB3200T超声波清洗器(上海必能信有限公司)；LG16-l具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇25ml，超声处理30min，放冷，补足重量，滤过，滤液备用。取上述样品溶液1ml于微型离心管中，以10000r/min 速度离心10min，取上清液备用，即得。 2.2 对照品溶液的制备 精密称取苦玄参苷IA对照品适量（5.25mg），置25ml量瓶中，用适量甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.21mg/ml的对照品溶液。 2.3 色谱条件 色谱柱为C18稳定性ODS2柱(5μm，4.6×250mm，大连依利特公司)，流动相为乙腈－0.3%磷酸(34∶66)，流速为1ml/min，检测波长为264nm，柱温为25℃，理论塔板数按苦玄参苷IA计算应不低于3000。在上述色谱条件下，供试品中苦玄参苷IA色谱峰能与其他成分分离，色谱图见图3.1～3.11。 2.4 线性关系考察 分别精密吸取上述苦玄参苷IA对照品溶液(0.21mg/ml)2μl、4μl、6μl、8μl和10μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积值。以峰面积为纵坐标，对照品进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，并求出回归方程为y=773.0x+1.85，r=0.9999。结果表明苦玄参苷IA进样量在0.42～2.10μg间呈良好线性关系，结果见表1，色谱图见图1，标准曲线见图2。 a为苦玄参苷IA 图1 苦玄参苷IA对照品HPLC色谱图 图2 苦玄参苷IA标准曲线图 表1 苦玄参苷IA线性关系考察结果 2.5 精密度试验 精密吸取苦玄参苷IA对照品溶液(0.21mg/ml)5μl，注入液相色谱仪，重复进样5次，测定苦玄参苷IA峰面积值，计算RSD=0.21%，结果见表2。 表2 精密度试验结果 2.6 稳定性试验 取供试品溶液（宁明），每隔4h分别进样10μl，测定苦玄参苷IA峰面积值，计算RSD=0.10%，表明供试品溶液在24h内保持稳定，结果见表3。 2.