NFκBp65和ICAM1在甲状腺肿瘤中的表达及相关性分析　论文.docVIP

　　NFκBp65和ICAM1在甲状腺肿瘤中的表达及相关性分析　论文 余红梅 蔡俊伟 陈世清 朱大菊 【摘要】 探讨NFκBp65和ICAM1在甲状腺肿瘤中的表达及相关性分析。方法：收集武汉大学人民医院及十堰市太和医院病理科1999年至2004年存档蜡块40例, 均为手术切除后诊断明确的甲状腺肿瘤, 其中,男20例,女20例,年龄23～71岁(平均43.8岁)；按照TC)10例,未分化癌(UTC)8例; 按照AJCC标准临床病理分期:Ⅰ期12例, Ⅱ期10例,Ⅲ期11例,Ⅳ期7例。同时取甲状腺瘤旁组织15例及正常甲状腺组织5例作对照。患者术前均未行放疗或化疗。采用组织学及免疫组织化学SP法,分别对乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌、甲状腺瘤旁组织及正常甲状腺组织的组织学结构变化、相关NFκBp65因子和ICAM1进行了观察，利用HPIAS2000图像分析系统测定了NFκBp65和ICAM1在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果： NFvκB p65和ICAM1在乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌细胞胞浆内表达强；NFκB p65和ICAM1在甲状腺瘤旁组织中表达极弱或无表达；NFκB p65和ICAM1在正常甲状腺组织中表达极弱或无表达。经单因素方差分析，各组间的差异有显著性意义(P＜0.05 )。经q检验，乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌与甲状腺瘤旁组织、正常甲状腺组织之间平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P＜0.01 )；甲状腺瘤旁组织与正常甲状腺组织之间平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P＞0.05)。结论：①NFκBP65具有调控ICAM1的表达作用；②NFκBp65和ICAM1与甲状腺肿瘤的发生、发展有密切的联系。 【关键词】 NFκB p65 ICAM1 甲状腺肿瘤 免疫组织化学 甲状腺肿瘤作为一种较常见的内分泌肿瘤，其中大部分为良性,.freel，常规脱蜡至水，蒸馏水洗； ② 3%过氧化氢，37℃孵育10 min以抑制内源性过氧化物酶活性，PBS洗4×5min； ③ NFκB、ICAM1采用微波抗原修复（3档，10min），PBS洗4×5min； ④ 正常羊血清37℃孵育10min以减少非特异性反应； ⑤ 一抗(NFκB，1: 200；ICAM1，1:150 )37℃孵育1h，PBS洗4×5min； ⑥ 生物素标记的二抗，37℃孵育10min，PBS洗4×5min； ⑦ 链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶复合物37℃孵育10min，PBS洗4×5min； ⑧ DAB显色液显色，自来水冲洗终止反应； ⑨ 苏木精复染，脱水，透明，封片。 用PBS代替一抗作为阴性对照组。 1.4 免疫组织化学结果判断 ① NFκBp65以胞核和胞浆出现棕黄色颗粒为阳性反应，ICAM1以胞膜和胞浆出现棕黄色颗粒为阳性反应。阴性对照组除细胞核染成蓝色外，应无棕黄色反应物。② 采用HPIAS1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统对NFκBp65和ICAM1的表达进行定量分析，每张切片随机选取5个高倍镜视野(×400)，测定每个视野下阳性反应的平均光密度、阳性反应面积和所有细胞总面积，计算阳性面积率。以每例5个视野的平均光密度、阳性面积率的平均值作为该例的测量值。 1.5 统计学处理 对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和q 检验，检验水准α为0.05。 2 结果 2.1 NFκBp65的表达 乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌细胞胞浆内有较多棕黄色颗粒，NFκBp65表达强；甲状腺瘤旁组织细胞胞浆内有少许或无棕黄色颗粒沉积， NFκBp65表达极弱或无表达；正常甲状腺组织细胞胞浆内有少许或无棕黄色颗粒沉积，NFκBp65表达极弱或无表达。经单因素方差分析，各组间的差异有显著性意义(P＜0.05 )。经q检验，乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌与甲状腺瘤旁组织、正常甲状腺组织之间平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P＜0.01) ；甲状腺瘤旁组织与正常甲状腺组织之间平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P＞0.05)。见表1。表1 甲状腺癌、甲状腺瘤旁组织及正常甲状腺组织NFκBp65表达的平均光密度和阳性面积率(略)注：* 乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌与瘤旁组织比较，P 0.01；# 正常甲状腺组织与乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌比较，P 0.01；** 瘤旁组织与正常甲状腺组织比较，P＞0.05。 2.2 ICAM1的表达 乳头状腺癌、滤泡性腺癌、髓样癌、未分化癌细胞胞膜和胞浆内有较多棕黄色颗粒，ICAM