SH关节腔内注射治疗兔膝关节炎的实验研究论文.docVIP

　　SH关节腔内注射治疗兔膝关节炎的实验研究论文 【关键词】 透明质酸钠 摘 要：［目的］探讨透明质酸钠（sodium hyaluronate，SH）关节腔内注射治疗膝骨性关节炎（OA）的效果。［方法］24只兔子建立骨关节炎动物模型，随机分OA组、SH组、对照组，观察3组软骨、滑膜细胞病理切片及软骨MMP1免疫组化，进行软骨Mankins评分，以及检测血液和关节液的IL1含量的效果。［结果］SH组可见软骨破坏减轻，滑膜纤维增生减少，Mankins评分有明显改善（P＜005）；血、膝关节滑液IL1浓度降低（P＜005）.freel hyaluronate injection on treatment of rabbit Osteoarthritis(OA)［Method］Tale rabbits ly divided into SH group,OA group and control group after established the model of OA,SH group，and control group e a e time respectivelyThe histological examinations of cartilage and synovia,immunohistochemistry of MMPl for cartilage,Mankin s scale edThe levels of IL1 of the serum and synovial fluid ined by ELISE［Result］In the SH group sho and synovial fluid mation of synovia and reduce the secretion of IL1 in synovial fluid and serumSo it can lighten the degeneration of the cartilage and alleviate the pathology of OA,but it can not prevent the process of OA Key hyaluronate; Osteoarthritis; Synovitis; Interleukin 1; Matrix metalloproteinase1 骨关节炎（osteoarthritis，OA）是中老年的最常见关节疾患之一，是导致人群功能残疾、造成经济损失和影响社会发展的主要疾病之一〔1〕。随着我国的老年化的发展，OA的患病率将更加增高，它成为骨科研究的热点之一。 治疗OA的方法较多，其中关节腔注射透明质酸钠自1971年Peyron首次报道以来，至今国内外已在广泛应用，在临床上取得良好的效果〔2~3〕。动物实验也表明SH是治疗OA的一种有效药物，但SH治疗OA的机理仍不清楚，本研究从SH对兔OA病理过程细胞因子的作用及对软骨损害的评估来进一步探讨SH治疗OA的实际疗效，为临床的应用提供一定参考。 1 材料与方法 11 主要材料、试剂 111 实验动物 取雄性新西兰兔24只，体重25 kg左右，6个月龄，清洁级SD（SpragueDal：20 mg／支山东正大福瑞达制药有限公司；金属蛋白酶（matrix metalloproteinases1，MMP1），购自美国默克公司。 12 实验分组与动物模型 24只新西兰兔进行右后膝伸直位全长石膏管型固定制成OA动物模型，所有兔均单笼饲养。模型制成后随机分为3个组（OA组、SH组、对照组），每组8只。 13 实验动物给药方法及标本处理 131 给药方法 OA组在OA动物模型形成时处死，SH组于膝关节给予关节腔内注射SH 04 ml，对照组于膝关节给予关节腔内注射生理盐水04 ml，每周1次连续4次，让其自由活动。SH组、对照组于最后1次注射后1周处死。 132 标本处理 所有动物在处死前于耳缘静脉取2 ml血液，静置后取上层血清，处死后取关节液02 ml。血液及关节液-20 ℃冰箱保存，留待检测其中IL1β含量。并取膝关节股骨髁及部分滑车部位的软骨和滑膜做光镜标本。滑膜行4％甲醛固定，再按常规脱水、浸蜡、包埋、切片、HE染色观察滑膜形态学变化。软骨标本采用4％多聚甲醛（pH 74）固定72h，15％乙二胺四乙酸（EDTA）脱钙10周，石蜡包埋，HE染色观察软骨形态学变化；ABPAS染色观察多糖着色，按Mankins评分。 14 检测方法 采用ELISA双抗夹心法标记所收集血清、血上清、关节滑液中的IL1β，使呈有色反应，酶标仪450nm处读取OD值，通过绘制标准曲线，计算出其中IL1β含量。 软骨标本制作病理切片后，常规脱腊脱水处