医学遗传学-遗传病的诊断.ppt

遗传病的诊断 概念：临床医生根据患者症状、体征以及各种辅助检查结果并结合遗传学分析，从而确认是否患有某种遗传病并判断其遗传方式及遗传规律。 遗传病的诊断 第一节 遗传病的临床诊断 第一节 遗传病的临床诊断 遗传病和某些普通疾病的症状与体征是有共性的，但也有其特有的临床表现，甚至形成特异性症候群。得出对疾病的初步印象，为进一步选择其他检查提供帮助。 特异性症候群 智力发育不全 毛发黄 腐臭味（尿液、汗液） 常见染色体病伴随体征 单凭症状和体征不能准确诊断，但可得出疾病初步印象，为进一步选择其他检查提供帮助。 第一节 遗传病的临床诊断 绘制系谱应注意的事项 系统、完整 去伪存真 注意新基因突变 （一）孟德尔式遗传病 （二）非孟德尔式遗传病 第二节 遗传病的细胞学诊断 智能发育不全、生长迟缓或伴有其它先天畸形者 夫妇中有染色体异常，如平衡易位、嵌合体等 家族中已发现染色体异常或先天畸形个体 多发性流产的妇女及其丈夫 原发闭经和男女不育症者 34岁以上的高龄孕妇 有两性内外生殖器畸形者 第二节 遗传病的细胞学诊断 X染色质、Y染色质： 方法简单，可鉴别胎儿性别以助于X连锁遗传病诊断；协助诊断两性畸形或性染色体数目异常疾病诊断或产前诊断 标本来源 发根鞘细胞、皮肤或口腔上皮细胞、女性的阴道上皮细胞、也可取自绒毛和羊水的胎儿脱落细胞。 第二节 遗传病的细胞学诊断 第二节 遗传病的细胞学诊断 第四节 遗传病的基因诊断 概念：利用分子生物学技术，直接探测遗传物质的结构或表达水平的变化情况，从而对被检查者的状态和疾病做出诊断。 一、基因诊断的特点 1、以探测基因为目标，属于“病因诊断”，针对性强； 2、基因诊断取材来源广泛； 3、利用基因探针进行检测，灵敏度高、特异性强； 4、基因探针适用性强，诊断范围广； 5、目的基因是否处于活化状态均可,无组织和发育特异性。 二、基因诊断的基本途径 直接诊断：直接检测致病基因本身异常 间接诊断：当致病基因已知而异常未知时，或者致病基因尚属未知时，可通过对受检者或者家系进行连锁分析,以推断其是否获得了带有致病基因的染色体。 基因诊断标本 症状前诊断 —— 外周静脉血 产前诊断 ——孕早期的绒毛细胞 孕中期羊水胎儿脱落细胞 母亲外周血中胎儿有核红细胞 植入前诊断 —— 受精卵卵裂细胞 孕中期（16-18周）的羊水胎儿脱落细胞 在怀孕12周之前，一般不采用羊膜穿刺法进行采样与诊断. 绒毛取样--创伤性产前诊断 绒毛膜绒毛取样比羊膜穿刺法更早采样与检查的诊断方法 怀孕10～12周 但风险比羊膜穿刺法要高。流产率高达2% 三、基因诊断常用方法及应用 原理：用已知核苷酸序列测定未知核苷酸序列。 方法：分子杂交、DNA体外扩增（PCR）、DNA测序、基因芯片技术，其中最基本技术是核酸分子杂交技术。 应用： 1978年简悦威（YW Kan）首次用DNA重组技术进行镰刀型贫血病产前诊断； 1982年普遍开始试用基因诊断技术； 迄今已对数百种遗传性疾病进行基因诊断和产前基因诊断。 ◆ 分子杂交 应用特异性探针在复杂的待检DNA中，利用碱基互补配对的原理来鉴定其同源DNA分子的过程。 Southern印迹杂交 ASO斑点杂交 ◆ PCR技术 PCR技术：体外快速扩增特异性DNA片断地技术，使能够达到足够分析的纯度和量。模板DNA可以来自一个细胞，一根头发、一滴精斑等都可以得到有效的扩增。 PCR-SSCP PCR-RFLP RFLP(限制性片段长度多态性) 人群中不同个体基因的核苷酸序列存在差异——DNA多态性。 DNＡ序列上发生变化而出现或丢失某一限制性酶切位点，使酶切产生的片段长度和数量发生变化称为RFLP（ restriction fragment length polymorphism ）。 RFLP分析 在亲子鉴定中的作用 RFLP 分析在法医学中的作用 ◆ DNA芯片 成千上万个寡核苷酸或cDNA探针密集、规律地排列在1cm2大小的硅片或玻璃芯片上，容量可达20～40万个基因探针。 荧光标记的DNA或cDNA样品送到在芯片上与探针杂交，通过激光共聚焦显微镜获取信息, 以计算机系统对荧光信号做出比较和检测，可迅速得出所需的信息，比常规方法快几十到几千倍。 母亲外周血中的胎儿有核红细胞 —非侵入性产前诊断 孕妇血有核红细胞（NRBC）含量极少，大约每1ml母血中只含5～20个胎儿细胞，NRBC更少，为每1ml含2～6个胎儿细胞，必须进行分离纯化才能利于进一步分析，做产前诊断。 正常胎盘并非是完善的、细胞透不过的屏障。在人类正常