dgh呼吸系统疾病动物模型2016-培训课件.ppt

结 论 本研究结果提示肺动脉高压的大鼠模型成功建立。 本研究模型的建立较好地模拟了 患者肺动脉高压发生的病理过程，可以应用于 患者的临床研究。 陈丽英等 低氧性肺动脉高压大鼠模型的建立 中华危重症医学杂志 2015，vol. 8 (5): 312-314 一、肺栓塞概述 肺栓塞的定义： 肺栓塞：指以各种栓子阻塞肺动脉系统为其发病原因的一组疾病或临床综合征的总称。包括：血栓、脂肪、羊水、胎粪、空气等栓子。 肺血栓栓塞：是指来自静脉系统或右心的血栓栓子阻塞肺动脉或其分支所致肺部疾病。主要表现为：肺循环障碍和呼吸功能障碍。 急性肺血栓栓塞导致较为广泛肺动脉阻塞时，可引起肺动脉高压，甚至发生急性肺源性心脏病。而缺血区可能发生肺梗死。由于肺组织多重供血、供氧机制，只有大约15%患者发生肺梗死。 第四节 肺栓塞动物模型 二、肺栓塞造模方法 （一） 血栓栓塞法 动物 造模因素 血栓形成 栓塞方法观察 家兔或犬 血栓栓子 1.动物麻醉后，分离一侧的颈外V和颈总A，并分别插管。 2.颈外V与颈总A连接在同一个三通管上。三通管余下的一个通道接上一个注射器(内含10U/ml凝血酶0.6ml)。 3.用注射器从动脉插管抽取动脉血1ml。 4.将注射器内动脉血与凝血酶充分混匀。 5.将混匀后的血液通过静脉插管注入颈外V，立即夹闭颈外V近心端。 6.等待10分钟，让血栓在颈外V内形成。 待颈外V内血栓明显形成后，松开颈外V近心端的静脉夹，血栓栓了入血后，栓塞肺动脉。 1. 方法 2.血栓栓塞法模型的特点： 家兔血栓栓塞法： 1)家兔体型适中，价格不高，性格温顺，插管较方便。 2)与其它动物相比，家兔的纤溶系统与人类的更接近。故，本模型是最普遍、最成熟的肺血栓栓塞模型。 犬血栓栓塞法： 1)犬体型大，血管粗，插管手术操作非常方便。 2)犬血量大，多次抽血样也不易发生低血容量的情况 。 3.血栓栓塞法模型的优点、缺点和应用： 优点： 兔血栓栓塞法模型是最普遍、最成熟的肺血栓栓塞模型。因为与其它动物相比，家兔的纤溶系统与人类的更接近。 缺点： 1)本法的血栓主要是在体外形成，与临床上肺血栓栓塞时，体内处于高凝状态不一样。 2)用犬做实验，有被咬伤或感染狂犬病的可能。 应用： 1)兔模型适用性广，是最常用的肺血栓栓塞模型。 2)犬模型更适用于取样量多、需要动态观察的肺栓塞实验研究。 （一） 药物注射法 动物 造模因素 血栓形成及栓塞方法 小鼠，也可用兔和犬 胶原与肾上 腺素的混合液 小鼠尾静脉注射制备好的胶原与肾上腺素的混合液1次，每次100μl。 该混合液可导致体内血液呈高状态，先是形成血小板血栓，后者阻塞肺小血管并导致肺栓塞。 1. 方法 2.药物注射法模型的特点： 1)药物注射法致肺血栓栓塞，简单快捷，方法可靠，稳定性好。 2)利用药物在体内形成静脉血栓，然后导致肺栓塞，比栓子栓塞法更符合临床实际情况。 3.药物注射法模型的优点、缺点和应用： 优点： 此方法简单快捷，可靠性和稳定性好。 缺点： 血小板血栓栓子较小，难以摸拟人肺内大血管栓塞情况。 应用： 1)小鼠肺栓塞模型，适合需要大规模样体的实验研究。 2)兔和犬肺栓塞模型，适合需要多次采样、动态观察指标变化的实验研究。 目的　 通过建立操作简便、成功率高、使用经济的急性肺血栓栓塞大鼠动物模型,掌握自体肺血栓栓塞动物模型的制备,检测自体肺血栓栓塞的持久性。 例四、大鼠自体肺血栓栓塞模型的成功制备 一、材料 二、方法 (体外制备血栓栓子) 2 大鼠麻醉后,行气插管,连接呼吸机 本实验研究发现：大鼠自血栓注入后并没有表现持续的肺动脉压升高或氧分压降低,因为大鼠具有极高的纤溶能力,所以自体血栓不能产生一个持久固定的肺栓塞模型。 结 论 因此与临床肺血栓栓塞的病理生理过程更符的、持久固定血栓模型的研究应成为今后肺栓塞动物模型的主要研究方向。 冯伟等 大鼠自体肺血栓栓塞模型的成功制备 临床肺科杂志 2015年5月 第20卷第5期：785-788 the end 谢谢！ 混合烟雾制烟方法： 1. 配方：锯末200g，烟叶15-20g，辣椒6-7g，硫黄1g。 2. 点燃后，在20-30分钟燃化，混合烟雾含尘量 150-200mg/m3，颗粒大小0.5-1.0μm以上。 香烟烟雾制烟方法： 1. 用香烟1.5支，在21L容器中燃化，豚鼠吸气10分钟。 2. 换气5分钟。 3. 用香烟1支，再次燃化，豚鼠再吸气10分钟。 流感病菌菌液制作方法： 1. 接种流感病毒