专题3、生物植物组织培养技术(视导课).ppt

* 专题3 植物组织培养技术 （一）植物组织培养的基础知识 （二）实验操作过程 （三）影响植物组织培养的因素 1、植物组织培养的基本概念 (1) 概念: 在无菌培养的条件下，将离体的植物器官（根，茎，叶，花，果实等）、组织（形成层，花药组织等）、细胞（体细胞，生殖细胞等）以及原生质体等培养在人工配制的培养基上，并给予适当的培养条件，使其长成完整植株的过程。 (2）原理： 植物细胞具有全能性。 (3）优点： P31 离体的植物器 官、组织细胞 根、芽 植物体 脱分化 避光 再分化 光照 愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程 一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。 2、植物组织培养的基本过程： 例如：1）菊花组织：嫩枝 愈伤组织 根、芽 植株 愈伤 组织 高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 花粉 胚状体 愈伤组织 从芽 生根 移栽 分化 再分化 诱 导 脱分化 2）花粉植株的培养途径 (P38) 这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于： 培养基中植物激素的种类及浓度配比 与合子胚 类似 2、下面关于植物组织培养的叙述，正确的是( ) A．叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞 B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C．通过植物组织培养，可培育出性状更优良的品种 D．植物体的任何一个体细胞经离体培养都表现出全能性 A 对点练习1 1、培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是: 植物组织培养 3、下列有关植物组织培养的叙述，正确的是( ) A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得 二、实验操作 培养基的配制 材料的选择 与消毒 接种、培养 移栽、栽培 1）培养基的配制 （P33） ?营养成份：常用的培养基是_________，主要成分包括：______、______ 、______及 _____等。在配制好的培养基中，常常需添加 和 两种植物激素。 一般先配制成培养基母液储存在4℃冰箱中，使用时根据浓缩比例，加水稀释。 启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。 使用顺序影响结果： 使用比例影 响发育方向： （记忆口诀）生前一分（裂）， 生后两分，同时高分（化率）。 记忆口诀：生大根，分大芽，等愈伤。 ?配制： MS培养基 大量元素 微量元素 有机物 蔗糖 生长素 细胞分裂素 欲有利于根的分化，植物激素的用量比例应为_____________________。 生长素多于细胞分裂素 2）取材及消毒 （1）取材：依据植物的生理状态选择 a、菊花组织： 原因： b、月季花药： 原因：P39 确定花粉发育时期的最常用的方法是 将花粉细胞核染成 色 ，染色剂呈 性。此外 还可用 法 ，染成 色。 生长旺盛的嫩枝 单核期的花粉（完全未开放的花蕾） 生理状态好，容易诱导脱分化和再分化 醋酸洋红 红 碱 焙花青-铬矾法 蓝黑 （2）消毒： → 无菌水 清洗 _______ 溶液消毒 → ________ 消毒 → _____ 清水 1%的次氯酸钙溶液 或饱和漂白粉 70%的酒精 0.1%氯化汞 无菌水 3）接种、培养 （1）接种操作要求： a、接种时要始终在 旁进行，对于接种工具要用 灭菌。菊花组织的茎段插入培养基时_________。 酒精灯火焰 灼烧 不要倒插 b、灭菌后的花蕾、在无菌条件下除去_________立即将花 药接种到培养基上。剥离花药时，尽量不损伤花药，同时彻底去除花丝。 萼片和花瓣 （2）培养条件 菊花组织：18-22℃，每天日光灯照12h； 花药培养：25℃，早期不需要光照，形成 幼小植株后才需要光照。 4）移栽、栽培 移栽： 栽培 去净培养基，可先在灭过菌的珍珠