RECK在宫颈癌中的表达及意义论文.docVIP

　　RECK在宫颈癌中的表达及意义论文 王玲 韩丽英 王强 李荷莲 【摘要】 目的 检测基质金属蛋白酶抑制剂RECK在宫颈癌组织中的表达，探讨其对血管生成的影响。方法 实验组(宫颈癌组织)26例以及对照组(正常宫颈上皮、慢性宫颈炎组织)24例，应用SP免疫组化法，经细胞计数及灰度测量检测RECK的表达，计数微血管密度(MVD)的值。比较二者的差异性。结果 RECK的表达在实验组的灰度值(7 848.74±1 276.04)明显低于对照组(657 282.8±30 681.16)(P 0.05);RECK在宫颈癌中表达与肌层浸润深度、盆腔淋巴结转移有关(P 0.05)，而与临床分期、组织学分型、组织学分级、脉管浸润无关(P 0.05)。MVD值在实验组(19.461 5±3.071 8)明显高于对照组(12.000 0±2.662 9)(P 0.05);二者呈负相关关系，r=-0.397,.freelotifs) 基因是近年来发现的新型MMP抑制剂.freel3大小组织，投入10%甲醛溶液中，4℃保存，供制备光镜标本用。组织经固定、脱水、包埋、5 μm连续切片。 1.3.2 实验方法 将切片进行HE染色和SP免疫组化。用Imagepro plus 6.0做灰度分析(IOD)，半定量计量RECK阳性率及IOD值，计数MVD值。 1.3.3 结果判定 ①RECK细胞计数判断标准：400倍镜下观察，在肿瘤细胞膜和/或细胞质有黄棕色或玫瑰红色颗粒沉着为RECK阳性染色。根据染色程度和染色细胞百分率进行评分：基本不着色为0分，淡为1分，适中为2分，深为3分;着色细胞占计数细胞百分率≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，≥51%为3分。将平均着色程度得分与平均着色细胞百分率得分相乘为其最后得分：≤1分为阴性(-)，2～3分为(+)，4～6分为()， 6分为()。②MVD计数结果判定标准：细胞间质内孤立的棕黄色血管内皮细胞或细胞簇或血管腔内径小于8个红细胞直径且管壁无肌层者代表1条单独的微血管。先在低倍(×100)视野下找到肿瘤组织内微血管密度最高的区域(热点)，然后在高倍(×400)视野下计数5个视野的微血管数，取其平均值。 1.4 统计学方法 使用SPSS11.0进行数据分析，RECK检测结果细胞计数以(-～)表示，灰度分析以IOD均值及标准差表示，MVD结果以均值及标准差表示。组间进行独立样本χ2检验、t检验及双变量相关性分析。 2 结 果 2.1 宫颈癌组织及对照组中RECK的表达 RECK在胞浆和胞膜处表达明显，宫颈间质中有适度表达，呈广泛性弥漫(见图1)。RECK在宫颈癌组织中阳性表达11例(42.31%)，而在对照组中呈高表达，阳性表达22例(91.67%)，组间比较有显著性差异(P=0.000 2)。26例宫颈癌组织IOD为7 848.74±1 276.04，24例对照组为657 282.8±30 681.16，经t′检验，宫颈癌组IOD值低于对照组，差异有统计学意义(t′=2.570 5，P=0.000)(见表1)。两种方法检验结果一致。 2.2 宫颈癌组织中RECK表达与肌层浸润和淋巴结转移的关系 经组间χ2检验，RECK在宫颈癌中表达与肌层浸润深度、盆腔淋巴结转移有关(P 0.05)，而与FIGO分期、组织学分级和组织学分型无关(P 0.05)。深肌层间质浸润、有盆腔淋巴结转移者，其RECK阳性表达率分别显著低于浅肌层浸润、无盆腔淋巴结转移者(P=0.018 4;P=0.023 7)。不同病理参数下RECK表达见表2。 表1 两组RECK的表达表2 RECK的表达与宫颈癌临床病理参数的关系 2.3 宫颈癌MVD的表达情况及与RECK的相关性分析 镜下观察血管染色结果，在宫颈癌组织中，微血管排列紊乱，着色不均一，大小不等，形状不规则，血管壁厚度不均(见图2)，而对照组中血管内皮细胞表达较清晰，形状规则，呈圆形或椭圆形，管壁厚度均匀。宫颈癌组中MVD明显高于对照组(P=0.000 0)。经线性回归分析，26例宫颈癌组织RECK表达与MVD值呈负相关(r=-0.397,P=0.049 5)(见表3)。表3 宫颈癌和对照组中MVD的表达及与REOK的相关性分析 3 讨 论 RECK基因是由日本学者Chiaki Takahashi等人在转染了vKiRas基因的NIH3T3细胞系表达的cDNA中分离出来的转录抑制基因。在正常组织或无肿瘤细胞系中广泛表达，而在癌基因转染的成纤维细胞或肿瘤细胞中低表达或无表达。RECK在转录后水平抑制MMP(特别是MMP2、MMP9、MT1MMP)的分泌与活性，还可以抑制proMMP9和proMMP2从细胞内的释放，从而抑制肿瘤的血管