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β胡萝卜素对大鼠急性放射性损伤的保护作用论文.doc
β胡萝卜素对大鼠急性放射性损伤的保护作用论文
王娟娟 马爱国 韩磊 单信芝
【摘要】 目的 观察补充β胡萝卜素对大鼠急性放射性损伤的保护作用。方法 取40只雌性SD大鼠,随机分为正常对照组(A组)、阳性对照组(B组)、β胡萝卜素5 mg/(kg·d)组(C组)、β胡萝卜素10 mg/(kg·d)组(D组)。照射前C组按5 mg/(kg·d) 灌喂β胡萝卜素,D组按10 mg/(kg·d)灌喂β胡萝卜素,A组及B组按照相同体积灌喂花生油。连续灌胃14 d,第15天除A组外,其余各组大鼠分别给予腹部单次剂量9 Gy一次性X线照射。4 d后处死大鼠,检测各组大鼠血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性。用单细胞凝胶电泳测定各组大鼠DNA损伤情况。结果 与B组比较,C、D组大鼠血浆MDA含量明显下降(F=5.23,q=4.20、2.80,P 0.05)。D组大鼠血浆GSHPX活性较B组明显升高(F=3.70,q=5.11,P 0.05)。0 μmol/L H2O2诱导淋巴细胞氧化损伤时,B组大鼠淋巴细胞DNA自发性损伤情况较其他3组严重(F=105.06,q=19.85~21.53.freelage. Methods Forty female SD rats ized to four groups: normal control group (A), positive control groups(B), 5 mg/(kg·d) βC group (C) and 10 mg/ (kg·d) βC group (D). Before radiation, 5 mg/(kg·d) of βC g/(kg·d) of βC to those in group D,.freele volume of peanut oil inistration lasted for 14 days.On 14th day, a single abdominal radiation of 9 Gy a superoxide dismutases (SOD), malondialdehyde (MDA), and glutathion peroxidase (GSHPX) age of DNA age of DNA in group B ost severe pared ent of a certain dose of βC age of DNA induced by radiation injury of the abdomen.
KEY alondialdehyde; Rats, SpragueDag/(kg·d)组(C组)、β胡萝卜素 10 mg/(kg·d)组(D组)。每组10只大鼠,分笼喂养。
1.1.2 实验材料 β胡萝卜素购自Sigma 公司;SOD、GSHPX、丙二醛(MDA)试剂盒由南京建成生物工程研究所提供;正常熔点琼脂糖(MP)、低熔点琼脂糖(LMP)、RPMI1640购自GibeoBRL公司;荧光剂DAPI购自Boehringer Mannheim公司;Tris购自Amresco公司;DPH购自美国Sigma公司;小牛血清购自Gibico公司;淋巴细胞分离液由爱普生物技术公司提供。
1.1.3 实验仪器 723型荧光分光光度计由日本岛津RF2540公司生产;3K30型低温离心机由德国Sigma公司生产; TCSSPZ荧光倒置共聚焦显微镜由Leica公司生产; DA含量的测定SOD活性采用羟胺法测定,测定波长为550 nm。GSHPX活性采用DTNB直接法测定,测定波长412 nm。MDA含量采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定,测定波长532 nm。
1.2.5 DNA损伤的检测和分析 采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)8。DNA损伤分级:0度为无损伤;Ⅰ度为淋巴细胞核周围出现毛糙;Ⅱ度为淋巴细胞核轻度拖尾;Ⅲ度为淋巴细胞核中度拖尾;Ⅳ度为淋巴细胞核完全散开。
1.2.6 统计学处理 所有数据均采用SPSS 11.0及PPMS 1.59统计软件进行处理,实验结果以±s表示,统计处理采用One DA浓度比较
与B组比较,C、D组大鼠血浆MDA含量明显下降(F=5.23,q=4.20、2.80,P 0.05);D组大鼠血浆GSHPX活性明显升高(F=3.70,q=5.11,P 0.05)。见表1。
2.3 对DNA损伤的影响
0 μmol/L H2O2诱导淋巴细胞氧化损伤时,B组大鼠淋巴细胞DNA自发性损伤较其他3组严重(F=105.06,q=19.85~21.53,P 0.05)。分别用5、10和20 μmol/L
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