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第四章第一节菌的防止
第四章 发酵工业的无菌技术;思考题
1、染菌对发酵有什么危害,哪些原因会引起染菌?染菌以后应采取什么措施?
2、简述好氧发酵时无菌空气制备的工艺流程与要求。
;什么是染菌?
发酵过程中除了生产菌以外,还有其它菌生长繁殖。;一、发酵工业的无菌处理 ;消毒(disinfection)是指用化学或物理的方法杀灭或去除病原微生物的过程,它一般只能杀死营养细胞而不能杀灭细菌芽孢。
消毒是一种采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌,而对被消毒的物体基本无害的措施。
;除菌(degerming)是用过滤方法除去空气或液体中的微生物及其孢子 。
防腐(antisepsis)就是利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖,从而达到防止食品等发生霉腐的措施。如低温、缺氧、干燥、高渗、添加防腐剂等。
;消毒与灭菌的区别
消毒与灭菌在发酵工业中的应用;二、发酵工业污染的防治策略;(一)污染(染菌)的危害;2、染菌危害的具体分析(1)染菌对不同菌种发酵的影响;B. 霉菌
PenG:青霉素水解酶上升,PenG迅速破坏,发酵一无所获。
柠檬酸:pH2.0,不易染菌,主要防止前期染菌。
C. 酵母菌: 易污染细菌以及野生酵母菌
D. 疫苗:无论污染的是活菌、死菌或内外毒素,都应全部废弃。
;(2)染菌种类对发酵的影响;污染噬菌体
噬菌体的感染力强,传播蔓延迅速,也较防治,故危害极大。
污染噬菌体后,可使发酵产量大幅度下降,严重的造成断种,被迫停产。 ;污染其它杂菌
有些杂菌会使生产菌自溶产生大量泡沫,即使添加消泡剂也无法控制逃液,影响发酵过程的通气搅拌。
有的杂菌会使发酵液发臭、发酸,致使pH下降,使不耐酸的产品破坏。
芽孢杆菌耐热,不易杀死。
;由于接种量较小,生产菌生长一开始不占优势,而且培养基营养丰富,容易污染杂菌。种子染菌对发酵危害极大,应严格控制种子染菌,如在此阶段染菌,应将培养液全部废弃。;发酵前期染菌;发酵中期染菌,处理困难,危害很大。处理方法应根据各种发酵的特点和具体情况来决定。 ;发酵后期染菌;(4)、杂菌污染对发酵产物提取和产品质量的影响;污染杂菌的种类对过滤的影响程度有差异
如污染霉菌时,影响较小,而污染细菌时很难过滤。由于过滤困难,过滤时间拉长,影响发酵液储罐和过滤设备的周转使用,破坏了生产平衡。
染菌发酵液还会因过滤困难而大幅度降低过滤收率,直接影响提取总收率。;2)发酵染菌对提取的影响;如果丝状菌发酵被产酸菌污染:则pH不断下降,菌丝大量自溶,发酵液粘度增加,过滤困难。
处理方法:①将发酵液加热后再加助滤剂;②先加絮凝剂使蛋白质凝聚后沉淀。
杂菌分泌较多蛋白质杂质时,对发酵后处理过程中采用溶媒萃取的提取工艺非常不利,使水相和溶媒之间极易发生乳化; (二)杂菌污染的防治1. 染菌的检查与判断;发酵过程的异常现象判断:
溶解氧、pH、尾气中的CO2含量、发酵液黏度、颜色等的异常变化,都可能是发生染菌的重要信息。
;溶解氧水平的异常变化
污染好氧性杂菌,溶解氧在短时间内下降,并接近零值,长时间不能回升;污染非好氧性杂菌,生产菌受到抑制,耗氧量减少,溶解氧升高。
pH异常变化
对于污染产酸菌或利用碳源效率高生长较快的杂菌,会使pH迅速下降。;1;尾气中CO2含量异常
污染杂菌,糖耗加快,CO2含量增加;感染噬菌体,糖耗减慢,CO2含量减少。;2、污染原因分析 ; 染菌原因 染菌百分率%
种子带菌或怀疑种子带菌 9.64
接种时罐压跌零 0.19
培养基灭菌不透 0.79
总空气系统有菌 19.96
泡沫冒顶 0.48
夹套穿孔 12.36
盘管穿孔 5.89
接种管穿孔 0.39
阀门渗漏 1.45
搅拌轴密封渗漏 2.09
罐盖漏
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