半矮生型桃节间长度相关基因的筛选和鉴定.pdfVIP

园 艺 学 报 2013 ，40 （5 ）：943 –952 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 半矮生型桃节间长度相关基因的筛选和鉴定 * 鲁振华，李钰婷，王志强 ，牛 良，崔国朝，王玉兰 （中国农业科学院郑州果树研究所，国家桃葡萄品种改良中心，农业部果树育种技术重点实验室，郑州 450009 ） 摘 要：为了进一步研究调控节间长度相关基因的表达模式及为克隆该半矮生性状的基因提供依据， 采用 cDNA-AFLP 分析方法对半矮生型桃节间“生长跃变期”差异表达的基因进行筛选，并对差异的转录 衍生片段（TDFs ）进行回收、克隆、测序、功能注释及qRT-PCR 验证。采用 256 对引物，共产生 9 021 个 TDFs，有明显差异的 TDFs 共 899 个，成功回收到 497 个 TDFs，254 条序列与已知基因高度相似。差 异表达的基因主要涉及到信号转导、生长发育、转录调控、蛋白质代谢、防御和物质与能量代谢等。选 取其中 26 个基因进行实时荧光定量 PCR 验证，结果表明 26 个基因的 qRT-PCR 表达丰度分析与 cDNA-AFLP 结果一致。分离到植物生长素、细胞分裂素、油菜素内酯、脱落酸、细胞周期等调控途径中 生长调控相关的候选基因，可为阐明节间生长调控机制奠定基础。 关键词：桃；半矮生型；cDNA-AFLP ；差异表达基因；节间长度；功能注释 中图分类号：S 662.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2013 ）05-0943-10 Screening and Identification of Genes Involved in Regulating Internode Length for Semi-dwarf Peach * LU Zhen-hua ，LI Yu-ting ，WANG Zhi-qiang ，NIU Liang ，CUI Guo-chao，and WANG Yu-lan （Zhengzhou Fruit Research Institute ，Chinese Academy of Agricultural Sciences，National Peach and Grape Improvement Center，Key Laboratory of Fruit Breeding Technology of Ministry of Agriculture ，Zhengzhou 450009 ，China ） Abstract ：This study aimed to select and identify genes related to regulate the length of internode ，and provide basis for revealing expression pattern of regulating internode length related genes and cloning the gene of controlling semi-dwarf trait. cDNA-AFLP technique was employed to investigate differentially expressed genes. The transcript-derived fragments （TDFs ）was recycled ， cloned ，sequenced and functionally annotated and then validate by