黄瓜果实弯曲相关基因Cs14的克隆及表达分析.pdfVIP

园 艺 学 报 2013 ，40 （5 ）：896 –904 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 黄瓜果实弯曲相关基因 Cs14-3-3 的克隆及表达 分析 * 徐 圆，秦智伟 ，周秀艳 （东北农业大学园艺学院，农业部东北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室，黑龙江省寒地蔬菜生物学重点 实验室，哈尔滨 150030） 摘 要：以黄瓜（Cucumis sativus L. ）果实易发生弯曲的品种‘长春密刺’为试验材料，采用RT-PCR 技术从果皮中分离并克隆了 14-3-3 蛋白基因，并将此基因命名为 Cs14-3-3 。Cs14-3-3 基因 cDNA 全 长 792 bp，编码263 个氨基酸，分子量 29 589.287 D ，等电点为4.585 。生物信息学分析表明此基因含有 14-3-3 蛋白基因的典型结构域，与其他物种 14-3-3 蛋白基因核苷酸序列同源性达到 75% 以上，编码的氨 基酸序列同源性达到 85% 以上，属于 14-3-3 蛋白基因家族。同时，采用实时荧光定量 PCR 方法对顺直果 实和弯曲果实腹部及脊部在果实开花的 2 、4 、6、8、10、12 d 的基因表达量进行了研究。结果显示，在 果实发育各个时期，Cs14-3-3 的表达量均为在弯曲果实腹部 顺直果实 弯曲果实脊部的表达量；在 各个部位，Cs14-3-3 在果实开花 2 d 的表达量明显高于开花后其他时期。试验结果表明，Cs14-3-3 基因为 黄瓜果实弯曲相关基因，在黄瓜果实开花早期发育过程中起重要作用。 关键词：黄瓜；果实弯曲；Cs14-3-3 基因；表达分析 中图分类号：S 642.2 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2013 ）05-0896-09 Cloning and Expression Analysis of Fruit Bending Related Gene Cs14-3-3 in Cucumber * XU Yuan ，QIN Zhi-wei ，and ZHOU Xiu-yan （College of Horticulture，Northeast Agricultural University ，Ministry of Agriculture Key Laboratory of Biology and Germplasm Enhancement of Horticultural Crops in Northeast China，Key Laboratory of Vegetable Biology in Heilongjiang Frigid Zone ，Harbin 150030，China） Abstract ：By RT-PCR technology ，we separated and cloned the 14-3-3 protein gene from the peel of the cucumber （Cucumis sativus L. ）bending variety ‘Changchun Mici ’，named Cs14-3-3．The full length cDNA of Cs14-3-3 is 792 bp，encoding a protein of 263 amino acids ．Its molecular mass is 29 589.287 D， and pI is 4.585. Bioinformatic analysis showed that the protein of Cs14-3-3 possesses the basic structure of 14-3-3 proteins，and shares high homology with the known 14-3-3 proteins，w