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紫外分光光度法测定破壁松花粉中胆碱含量 张艳杨小明费学谦杜方麓 (中国林科院松花粉研究开发中心) 摘要采用紫外分光光度法测定破壁松花粉中胆碱含量。分析结果表明，本方法重现性好， 收度呈良好线性关系，r=0．9985。用此方法测定破壁松花粉中胆碱平均含量为235mg／1009。 该方法简单、快速，结果准确，可用于相关制剂的质量控制。 关键词破壁松花粉胆碱紫外分光光度法含量测定 1引言 massoniana 松花粉是松科植物马尾松(Pinus Lamb．)的雄性孢予体，营养丰富，对人体 无过敏和毒副作用【11。据报道，松花粉中富含蛋白质，脂肪，游离氨基酸，还含有铁、铜、 锌、锰、镍、铬、钴、锡、硒、钾、钙、镁等微量元素和多种微生素及泛酸、尼克酸、叶 酸、胆碱等活性物质，这些成分对人体生理功能和各器官系统生理活动都有奇妙的调节作 用。目前已知松花粉对动脉硬化、脑溢血、中风后遗症、贫血、肠炎、神经衰弱、便秘、 胃肠自身中毒以及体质虚弱、体重减轻等症状均有较好作用，同时还具有促进新陈代谢、 治疗胃肠功能紊乱、阻止肠道病毒和微生物繁殖等功能。 目前市场上松花粉产品多种多样，但都没有活性成分含量测定的方法学考察。因此， 我们对亚林牌松花粉的胆碱含量进行了紫外分光光度法测定的研究，建立了松花粉中胆碱 的准确、快速定量测定方法，为其质量标准的确定提供参考。 2实验部分 2．1仪器与试药 754型紫外分光光度计(上海第二分析仪器厂)；sartoriusBP21llD电子天平；水 浴锅(北京中兴伟业仪器有限公司)；autoscience 机。氯化胆碱对照品(0080--9705)：中国药品生物制品检定所。雷氏盐，甲醇，丙酮， 正丙醇均为A．R．，体积分数20％的硝酸水溶液。破壁松花粉由中国林科院松花粉研究开 发中心提供。 2．2溶液的制备 2．2．1对照品溶液的制备 精密称取标准氯化胆碱(置真空干燥器中五氧化二磷干燥至恒重)1．00019，用蒸馏水 2．2．2样品溶液的制备 烧杯中，用浓碱液调pH89，加入30ml甲醇，摇匀，置冰箱过夜。次日取出过滤，用 lOOml小烧杯收集滤液，在水浴上浓缩至20--25ml，冷却。加入5ml 5％的雷氏盐一甲醇 分钟，取下层沉淀，用正丙醇洗涤沉淀8次(每次用正丙醇5m1)，再用丙酮溶解沉淀，于 25m1容量瓶中定容。 3方法与结果 3．1测定波长的选择 据文献介绍，胆碱最大吸收波长在526nm左右【2J，故取对照品溶液，以蒸馏水为空白， 在200～800nm波长范围内进行扫描。结果表明氯化胆碱在522nm波长处有最大吸收， 故本实验选择522nm作为测定波长。 3．2标准曲线的制备 加入5％雷氏盐溶液5ml，摇匀，置冰箱中2h以上，生成胆碱雷氏盐结晶，将结晶水溶 液离心，再用正丙醇洗涤沉淀8次(每次用正丙醇5m1)，用丙酮溶解沉淀，溶液转置25ml 容量瓶定容，按紫外分光光度法pJ，以丙酮溶液为空白，在波长522nm处测定吸收度， 实验结果表明，氯化胆碱浓度在0．040．44mg／mL范围内，与吸收度呈良好线性关系。 表l吸光度的测定 胆碱标准曲线图 3．3精密度试验 取同一批亚林牌破壁松花粉样品，按2．2．2项下样品溶液的制备及3．2项下测定法制 表明仪器精密度良好。 表2精密度试验 3．4重复性试验 精密称取同一批样品约5克，共5份，分别按2．2．2及3．2项下实验方法，制备供试 品溶液，．并进行检测，测得胆碱含量如表3，实验所得RSD为2．Ol％，可见，该方法重 复性良好。 表3重复性考察 3．5稳定性试验 称取亚林牌破壁松花粉样品2份，每份5克，分别按2．2．2及3．2项下实验方法，制备 和1．48％，说明样品中胆碱含量在72小时内稳定性良好。 表4 供试品溶液的稳定性考察 3．6样品含量测定 取三批样品溶液在波长522n