转胆碱单氧化物酶CMO基因棉花的耐盐性.pdfVIP

转胆碱单氧化物酶(CMO)基因棉花的耐盐性 班合忠，，张艘军2，唐 蔽，‘李维江，，罗 振， (1山东棉花研究中心，济南250100;2.山西省农科院棉花研究所，运城044000) 摘 要:在温室盆栽条件下，于2片真叶期对5个转胆碱单氧化物酶(CMO)基因的棉花品系及转化 受体泅棉3号施加。.5%的NaCl胁迫，15天后测定发现，NaCl胁迫无一例外地抑制了所有供试品系 的光合作用和植株生长，表现为真叶数、株高和鲜重减少，光合速率、蒸腾速率和气孔导度降低。但 是，盐胁迫对转CMO墓因的抑制效应明显低于对照，表明转CMO基因棉花品系的耐盐性有明显提 高。不过，棉花的耐盐性涉及多个基因和多种耐盐机制的协同作用，从本研究结果来看，转化单个基 因提高棉花耐盐性的作用是有限的。 关键词:胆碱单氧化物酶(CMO)基因;棉花;耐盐性 IncreasedToleranceofSeedlingPlantstoNaClStressinTransgenicCMO (CholineMonooxygenase) DONGHe-zhong， Lu ZHANGHaij.,TANGWeil,LIWei一iang 1Zhen (1CottonResearchCenter,ShandongAcademyofAgriculturalSciencesJinan250100;2CottonResearch Institute,ShanxiAcademyofAgriculturalSciences,Yuncheng044000) 甜菜碱是存在于黍科、锦葵科和茄科植物体内的重要渗透保护剂[[3]。在受到盐胁迫时，植物体 内可通过迅速合成并积累包括甜菜碱在内的小分子化合物以维持细胞的正常功能，从而产生对外界 胁迫的适应性防御反应=][。业已证明，高等植物中甜菜碱由胆碱经由两步氧化反应合成:胆碱一甜 菜碱醛、甜菜碱，其中由胆碱单氧化物酶(CMO)催化的第一步氧化反应是限速步骤，甜菜碱醛脱氢 酶(BADH)催化第二步氧化反应[[3]甜莱碱作为一种非常有效的渗调剂，它的相关代谢途径成为抗 逆基因工程研究的重点。中国科学院遗传研究所已从山菠莱中获得CMO基因克隆，转人到烟草中获 得了具有一定耐盐性的烟草植株[e]。本文报道的是对转CMO基因棉花的耐盐性的初步研究。 1材料和方法 本试验所用的5个转CMO基因材料和1个受体材料(对照)均由山西省农科院棉花研究所提供。 CMO基因由中国科学院遗传研究所构建，山西农科院棉花研究所完成转化。5个转基因材料是对浪乌棉3 号(SM-3)转化CMO基因后形成的5个姊妹系，分别编号为CMO1,CM02,CM03,CM04和CM050 将5个转基因材料和泅棉3号播于装满大田表层土的塑料盆中。盆高30cm，直径25cm，底部 透水孔以塑料薄膜阻住，以防漏水。在第2片真叶展并后，以0.5%的卡那霉素点涂主茎倒2叶，5天 后拔除叶色变黄的非转基因植株，然后定苗，每盆留苗5株。 每个材料通过逐次加人5%的NaCl溶液，使含盐量达到0.5%左右(千土含盐量,W/W)，以不加 Nacl的处理为各自的对照。每天清晨6;00左右对各塑料盆称重，通过及时补水保证各处理的土壤 含水量维持在最大持水量的75%左右。处理15天后，以11-6400便携式光合作用测定仪(美国11- COR公司生产)测定主茎倒3叶的光合速率(Pn)和其它光合参数(气孔导度，Cond;蒸腾速率，Tr)a 计载真叶数、株高和鲜重。以盐害指数评判各材料的耐盐性，计算方法为:盐害指数二(1一盐胁迫下测 定值/无盐对照测定值)x100%。 2 结果与分析 2.1NaCl处理对转CMO棉花苗期生长的影响 六个材料在盐胁迫巧天后的真叶数、株高和鲜重皆受到极大影响.以盐害指数作为评判指标可 以看出，转CMO的5个棉花品系所受的盐害远远小于非转基因的对照，表现出明显强于对照的耐盐 性，其中尤以CM02和CM04的耐盐性最强。 表1NaC处理对转墓因棉苗生长的影响 0.0% NaCl 0.5% NeCI 盐害指数 材料 真叶数 株 高 鲜 重 真叶数 株 高 鲜 重 真叶数 高 鲜 重 平均