冠心丹参片有效部位三七总皂苷的含量测定论文.docVIP

　　冠心丹参片有效部位三七总皂苷的含量测定论文 魏惠珍，张洁，张红红，王跃生，方海红，饶毅，李新南 【摘要】 目的紫外分光光度法测定冠心丹参制剂中三七总皂苷的含量。方法UV法，测定波长548 nm。结果线性范围0.020 2～0.202 mg；平均回收率:97.38%.freelination method of total saponins of Panax notoginseng in Guanxin Danshen tablet by UV. MethodsUV, the detection . ResultsThe linear range g. The average recovery ethod is simple, highly accurate, and it can be used for quality control of Guanxin Danshen tablet. Key etry 冠心丹参片由丹参、三七、降香油3味药组成，具活血化淤、理气止痛之功效，为《中国药典》77方剂。临床用于气滞血淤所致的胸闷、胸痹等，冠心病见上述证候者［1］。其中三七为该方的君药，具滋补强壮，活血化淤，消肿止痛等功效。现代研究表明，三七总皂苷是三七中的有效活性部位，具有强心、扩张冠状动脉、增加冠状血流量、抗动脉粥样硬化等药理作用［2］。 根据国家新药的有关规定，对冠心丹参片的二次开发，需对其有效部位建立测定方法。目前对冠心丹参片中有效部位三七总皂苷的分析尚未见报道。为综合评价冠心丹参片质量，本文首次采用紫外分光光度法测定了冠心丹参片中三七总皂苷的含量，优选了显色剂的比例并通过D101大孔树脂柱的分离去除丹参酚酸类成分的干扰，为更好地控制冠心丹参片提供质量评价手段。 1 仪器与试药 日本岛津UV-2550紫外分光光度计，UV-Probe工作站；岛津AU波长范围进行扫描，发现548 nm处有最大吸收。实验中选择测定波长为548 nm。 2.1.2 样品中三七总皂苷的测定取样品，研成细粉，取约70 mg,.freell回流0.5 h，放冷，滤过，用甲醇洗涤容器，滤液并洗涤液至100 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，从中精密吸取溶液10 ml，蒸干，残渣加水溶解并转移至5 ml量瓶中，用水稀释至刻度，再从中精密吸取溶液1 ml，装入已处理好的D101大孔树脂柱（湿法装柱，用水100 ml预洗，内径1.2 cm，树脂装至高14 cm），先用20%乙醇50ml洗脱，洗脱液弃去，继用70%乙醇洗脱，收集100 ml，蒸干，残渣用甲醇转移至2 ml量瓶中，并稀释至刻度，作为供试品溶液。精密吸取供试品溶液1 ml，置具塞试管中，80℃水浴挥干，冷却至室温，按“2.1.4”项下方法显色，即得。 2.1.3 阴性干扰实验取处方中缺三七总皂苷的阴性样品，照供试品溶液制备项下操作，即得阴性对照供试液。对冠心丹参供试品溶液及缺三七阴性对照溶液分别进行紫外光谱扫描。在548 nm波长处进行扫描。紫外吸收光谱图（见图1～2）。冠心丹参中缺三七的阴性对照样品无干扰。 图1 冠心丹参样品UV吸收光谱图（略） 2.1.4 显色方法精密吸取对照品溶液/样品溶液1.0 ml，置具塞试管中，置80℃水浴挥干，冷却至室温，加新制的5％香草醛冰乙酸溶液0.2 ml，高氯酸0.8 ml，60℃水浴加热15 min，立即用水冷却，加冰乙酸5.0 ml，摇匀，即可。 显色剂比例的考察：显色剂的比例对测定结果有影响，为此考察显色剂的比例（见表1）。显色剂以5％香草醛冰乙酸与高氯酸的比例为0.2∶0.8为宜。 图2 冠心丹参样品缺三七阴性对照UV吸收光谱图（略） 表1 三七总皂苷显色剂比例考察（略） 显色反应时间的考察：显色反应时间对测定结果有影响，为此考察显色反应时间（见表2）。反应时间为15 min为宜。 表2 三七总皂苷显色时间的考察（略） 2.2 样品的提取 2.2.1 三七总皂苷的提取经预实验表明，样品中的丹参酚酸类成分对三七总皂苷的测定有干扰，故设计过柱洗脱去除干扰。 2.2.2 乙醇洗脱浓度确定分别取丹参酚酸提取物、三七总皂苷提取物，精密称定，置150 ml回流瓶中，加甲醇50 ml回流1 h，放冷，滤过，用甲醇洗涤容器，滤液并洗涤液至100 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，从中取10 ml，蒸干，残渣加水溶解并转移至5 ml量瓶中，用水稀释至刻度，再从中取1 ml，装入已处理好的D101大孔树脂柱（内径1.2 cm，高14 cm），分别用20%乙醇30 ml，20%乙醇60 ml，20%乙醇80 ml，70%乙醇50 ml，70%乙醇100 ml洗脱，分别收集各洗脱液，蒸干，残渣用甲醇1 ml溶解，作为供试