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　　冷冻干燥保存血小板的实验研究论文 刘景汉，周俊，王冬梅，欧阳锡林，邢颜超，卢发强 【摘要】 本研究探讨冷冻干燥保存血小板的方法，以获得可长期冻干保存的血小板制品，使之能在常温条件下保存、占用空间小、重量轻、便于长距离运输.freelental Study on Lyophilization of Platelets Abstract The aim of this study sto rage of human platelets at normal temperature aller size and lighter eet the demands in accidents and e. Human platelets e time, the recovery rate of platelets, platelet maximal aggregation induced by thrombin, coagulation of platelets, CD62p expression and PAC1 expression aximal aggregation induced by thrombin had no significant difference beta (FPRP), but the aggregation of platelets induced by ADP or propyl gallate FPRP. CD62p expression of the lyophilized platelets (42.36％) bin ay enhance their survival ability and prolongate survival time. Therefore the efficiency of lyophilizing platelets can be improved based on this freezedrying procedure. Key ,.freela公司产品），百维利肽（Bivalirudin, Medicine公司产品）左旋精氨酸（Larginine, Sigma公司产品），PGE1（商品名保达新）、海藻糖（trehalose)购自南宁中诺生物工程公司）、二甲亚砜（DMSO，天津医药公司产品）。荧光素标记的特异性血小板膜表面抗体及相关多肽：PAC1－FITC， CD62P－PE，CD61－PerCP，MIgGI－PE等购自Becton Dickinson公司；RGDS肽和GPRP （GlyProArgPro乙酸盐）购自Sigma公司产品。血小板聚集诱导剂包括：凝血酶（thrombin， Sigma公司产品），二磷酸腺苷（ADP， Sigma公司产品），丙基没食子酸（Propyl gallate， Analytical ControlSystems公司产品）。 MEK6108K型全自动血细胞分析仪（Nihon Kohden公司产品），APACT2聚集仪（德国Lanbo公司产品），FACSCalibur流式细胞仪（Becton Dickinson公司产品）和CellQuest分析软件， Centrifuge 5415D离心机（Eppendorf），Biofuge15R（Heraeus公司产品），台式冷冻干燥机（TFFD1）。 实验分组 实验为配伍设计，5份PCs，各准备15 ml。设对照组和2个实验组，对照组为新鲜富含血小板血浆（FPRP），不进行任何处理。每份PCs分3个试管，2ml/tube，分至各组，剩余的离心（2 287×g,15分钟），留取少量血小板血浆（PPP）备用。 前处理（海藻糖负载） 血小板中加入预处理液，实验组1含海藻糖 45 mmol/L和DMSO 3%，实验组2含海藻糖 45 mmol/L，DMSO 3%，PGE1 1 μmol/L，LArg 5 mmol/L，Phy 0.5 mmol/L和Bivaridin 0.5 μmol/L。将各组样品混匀后，37℃水浴4小时，每20分钟振摇1次。 血小板冷冻干燥、预水化和再水化 血小板悬液1 111×g离心8分钟，用冷冻干燥液1 ml（HEPES 9.5 mmol/L，NaCl 142.5 mmol/L，KCl 4.8 mmol/L，MgCl2 1.0 mmol/L， trehalose 150.0 mmol/L，PGE1 1 μmol/L， LArg 5 mmol/L，Phy 0.5 mmol/L， Bivaridin 0.5 μmol/L，DMSO 3%，人血清白蛋白 5%）在硅化后的玻璃瓶中重悬血小板，血小板PCT为40%-50%，干燥厚度 1 cm，进行冷