氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增效率_灵敏度和特异性的影响_蒋城.pdfVIP

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2017-08-20 发布于湖北
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氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增效率_灵敏度和特异性的影响_蒋城.pdf

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氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增效率_灵敏度和特异性的影响_蒋城

网络出版时间：2017-04-20 17:40:34 网络出版地址：/kcms/detail/11.1844.x1740.012.html 第３６卷　第４期环　境　化　学Ｖｏｌ．３６，Ｎｏ．４２０１７年　　４月ＥＮＶＩＲＯＮＭＥＮＴＡＬＣＨＥＭＩＳＴＲＹＡｐｒｉｌ２０１７ＤＯＩ：１０．７５２４／ｊ．ｉｓｓｎ．０２５４⁃６１０８．２０１７．０４．２０１６０７２２０３蒋城，杨中柱，赵美莲，等．氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增效率、灵敏度和特异性的影响［Ｊ］．环境化学，２０１７，３６（４）：７２４⁃７２９．ＪＩＡＮＧＣｈｅｎｇ，ＹＡＮＧＺｈｏｎｇｚｈｕ，ＺＨＡＯＭｅｉｌｉａｎ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｇｒａｐｈｅｎｅｏｘｉｄｅｏｎｔｈｅａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１７，３６（４）：７２４⁃７２９．氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增效率、灵敏度和特异性的影响∗ 蒋　城　杨中柱　赵美莲　宋　瑱∗∗ （成都中医药大学医学技术学院，成都，６１１１３７）摘　要　以人类基因组ＤＮＡ和志贺氏菌粗制裂解菌液为模板，扩增１１５ｂｐ的Ａｌｕ基因片段和４０２ｂｐ的ｉｐａＨ基因片段．通过设置氧化石墨烯（ＧｒａｐｈｅｎｅＯｘｉｄｅ，ＧＯ）和模板的浓度为变量，分别研究了氧化石墨烯对聚合酶链式反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）扩增效率和灵敏度的影响；运用多轮ＰＣＲ扩增方法研究了氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增特异性的影响．结果显示，氧化石墨烯有效提高ＰＣＲ扩增效率的范围为９—１４倍，提高ＰＣＲ灵敏度一个数量级以及增加多轮ＰＣＲ扩增中的两轮扩增反应．从原子力显微镜（Ａｔｏｍｉｃｆｏｒｃｅｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ＡＦＭ）的结果可以看出，本文制备的氧化石墨烯片层厚度主要集中在０．５—０．８ｎｍ，少数大于１ｎｍ，－１总体具有较大的比表面积．除此之外，本文还发现当氧化石墨烯浓度到达 μｇ·μＬ后，引物二聚体与氧化石墨烯的浓度呈正比，说明氧化石墨烯优化ＰＣＲ的主要影响因素是其与引物的相互作用．关键词　氧化石墨烯，聚合酶链式反应，扩增效率，灵敏度，特异性．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｇｒａｐｈｅｎｅｏｘｉｄｅｏｎｔｈｅａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＪＩＡＮＧＣｈｅｎｇ　　ＹＡＮＧＺｈｏｎｇｚｈｕ　　ＺＨＡＯＭｅｉｌｉａｎ　　ＳＯＮＧＺｈｅｎ∗∗ （ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＣｈｅｎｇｄｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｃｈｅｎｇｄｕ，６１１１３７，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴａｋｉｎｇｔｈｅｈｕｍａｎｇｅｎｏｍｅＤＮＡ