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第七章_发酵液预处理和固液分离方法
优点: 真空转鼓过滤机具有自动化程度高、操作连续、处理量大。特别适合固体含量大(10%)的悬浮液的分离,在发酵工业中广泛用于霉菌、放线菌和酵母发酵液或细胞悬浮液的过滤分离。 缺点: 由于受真空度的限制,不适于菌体较小和粘度较大的细菌发酵液的过滤,且过滤所得固相的干度不如加压过滤。 * (二)离心分离 基于固体颗粒和周围液体密度存在差异,在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程。 动植物细胞的收集、细胞碎片和沉淀的分 离等常用离心分离。 离心机的种类与用途 低速离心机: 高速离心机: 超速离心机: 其最大转速在8000 r/min以内,主要用于细 胞、细胞碎片和培养基残渣等固形物的分离。 最大转速为(1~2.5)×104 r/min ,主要 用于细胞碎片和细胞器等较小固形物的分离。 最大转速达 (2.5~12)×104 r/min,主要用 于DNA、RNA、蛋白质等生物大分子以及细 胞器、病毒等的分离纯化。 * * 按离心机的作用方式: 斜角式 平抛式 管式 碟式 离心机的种类与用途 * 1)斜角式离心机 是一类结构最简单的实验室常用离心机; 指离心管腔与转轴成一定倾角的转子。 * 2)平抛式离心机 平抛式离心机一类结构简单的实验室常用的低中速离心机,转速一般在 3000-6000rpm。 * 3)管式离心机 管式离心机具有一个细长而高速旋转的转鼓,转鼓内装有纵向平板, 其下部有进料口。上部两侧有重液相和轻液相出口。 * 由机身、传动装置、转鼓、集液盘、进液轴承座组成。 GF型: GQ型: 用于分离各种浮浊液,进行液-液分离,如油脂; 用于分离各种难于分离的悬浮液,进行液-固分离,特别适合于浓度小粘度大,固相颗料细,固液重度差较小的固液分离,如各种药液。 * 4)碟片式离心机 是生物工业中应用最为广泛的一种离心机 有一个密封的转鼓,内装十至上百个锥顶角为60~100゜锥形碟片。 碟片间的距离一般为0.5-2.5mm * 碟片式离心机工作原理 当悬浮液在动压头的作用下,经中心管流入高速旋转的碟片之间的间隙时,便产生了惯性离心力, 其中密度较大的固体颗粒在离心力作用下向上层碟片的下表面运动,而后在离心力作用下被向外甩出,沿碟片下表面向转子外围下滑, 而液体则由于密度小,在后续液体的推动下沿着碟片的隙道向转子中心流动,然后沿中心轴上升,从套管中排出,达到分离的目的 * 思考题 1发酵液为何需要预处理?处理方法有哪些? 2凝集与絮凝过程有何区别?如何将两者结合使用? 3固液分离的方法有哪些? 4改善过滤过程的方法? 它有一水平转鼓﹐鼓壁开孔﹐鼓面上铺以支承板和滤布﹐构成过滤面。 过滤面下的空间分成若干隔开的扇形滤室。 各滤室有导管与分配阀相通。 转鼓每旋转一周﹐各滤室通过分配阀轮流接通真空系统和压缩空气系统﹐顺序完成过滤﹑洗渣﹑吸干﹑卸渣和过滤介质(滤布)再生等操作。 在转鼓的整个过滤面上﹐过滤区约占圆周的1/3﹐洗渣和吸干区占1/2﹐卸渣区占1/6﹐各区之间有过渡段。 过滤时转鼓下部沉浸在悬浮液中缓慢旋转。 沉没在悬浮液内的滤室与真空系统连通﹐滤液被吸出过滤机﹐固体颗粒则被吸附在过滤面上形成滤渣。 滤室随转鼓旋转离开悬浮液后﹐继续吸去滤渣中饱含的液体。 当需要除去滤渣中残留的滤液时﹐可在滤室旋转到转鼓上部时喷洒洗涤水。 这时滤室与另一真空系统接通﹐洗涤水透过滤渣层置换颗粒之间残存的滤液。 滤液被吸入滤室﹐并单独排出﹐然后卸除已经吸干的滤渣。 这时滤室与压缩空气系统连通﹐反吹滤布松动滤渣﹐再由刮刀刮下滤渣。 压缩空气(或蒸汽)继续反吹滤布﹐可疏通孔隙﹐使之再生。 * * ? 发酵后期要少加消泡剂和少进行补料,防止消泡剂和未用完的培养基增加过滤难度; ? 菌体自溶前放罐可防止因菌体自溶释放出的代谢产物增加发酵液黏度 1)菌体细胞体积 ? 真菌菌丝体较粗大,质量比阻小,发酵液不需经特殊处理就很容易过滤; ? 放线菌菌丝细而分支,交织成网格状,质量比阻力大,较难过滤,发酵液需经预处理,凝固蛋白质等胶体物质,提高过滤速度; ? 细菌菌体更小,发酵液如不经絮凝等预处理,很难用常规过滤设备进行过滤操作。 2)培养基组成 黄豆饼粉、花生饼粉等会增加过滤难度 3)放罐时机 二、影响发酵液固液分离的因素 * 常见的固液分离方法 过滤 filtration 离心 Centrifugation 膜分离 membrane separation 双水相萃取 ATPS 扩张床吸附 EBA * (一) 过 滤 filtration 借助于过滤介质,在一定的压力差作用下, 使悬浮液中的液体通过介质的孔道,而固体颗粒被截留在介质上,从
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