稀土离子Tb3+对卵清蛋白稳定性的影响.pdfVIP

V01．37 高等学校化学学报 No．7 2016年7月 CHEMICAL JOURNALOFCHINESEUNIVERSmES 1245～1249 稀土离子Tb3+对卵清蛋白稳定性的影响 宋珍1…，董金龙1，任跃红1，袁雯1，张彩凤1，一，杨斌盛2 (1．太原师范学院化学系，太原030012； 2．山西大学分子科学研究所，化学生物学与分子工程教育部重点实验室，太原030006； 3．山西省腐植酸工程技术研究中心，太原030012) mmol／L 摘要在室温、pH=7．4、104-羟乙基哌嗪乙磺酸(Hepes)缓冲溶液条件下，利用荧光光谱研究了卵 的复合物，Tb“的结合使其疏水区暴露程度增加，INS的荧光增强．Ova的解折叠曲线呈现三态的变化 (N—一I—一u)．Ca“可以增加I；=一U过程的稳定性，叻“对N—一I和I—一u两个解折叠过程都有影响． 关键词卵清蛋白；Tb“；稳定性 中图分类号0614；0629．73文献标志码A 蛋白质是生物体中的重要物质，其在生命体中执行生物功能时，必须维持特定的三维空间结 构…．蛋白质从氨基酸序列折叠成具有生物功能的高级结构时受到很多因素的影响，如盐的浓度、温 度、分子伴侣等口J．大多数天然态的蛋白都含有1个疏水中心，侧链通过相互堆积作用稳定蛋白质的 天然构型，极性侧链在外围与溶剂分子相互接触．降低疏水侧链在水环境中的暴露程度是蛋白质折 叠过程的驱动力之一¨一．蛋白质折叠过程具有高度的复杂性，使得表征蛋白质部分折叠中间态的构型 极其困难∽1．蛋白质折叠过程中会形成各种中间态，从一个类似于完全解折叠态的构型到一个类似于 天然态的构型怕j．在天然态和解折叠态之间是否存在或存在多少个中间态引起了科学家的极大兴趣． 蛋白质的氨基酸序列决定了蛋白质折叠态到天然态的路径及天然态的构型．也有氨基酸序列相同，但 构型不同的蛋白质．这主要是由于蛋白质的折叠还受到环境因素的影响．影响蛋白质折叠的作用力主 要包括疏水相互作用、分子间氢键和范德华力等∞J． 氨基酸残基组成的单肽链组成，二级结构中包含 30．6％d螺旋和31．4％口折叠片¨J．卵清蛋白是 蛋清蛋白中唯一含有自由巯基的蛋白，这些巯基都 被埋藏在蛋白质的疏水核心部分．卵清蛋白晶体结 构显示其含有3个色氨酸，可以与钙离子发生相互 作用(图1)． 研究表明【8—0；，在酸度诱导的卵清蛋白解折叠 过程中，当pH=2左右时会出现一个中间态．本文 Structureof 使用光谱法研究了稀土离子铽(Tb)与卵清蛋白的Fig．1 Ova(PDBlOva)drawnbyusing software 相互作用及其对卵清蛋白稳定性的影响．结果表 Pymol as wasshownassticks． Ca2+wasshown 明，铽可以与卵清蛋白以2：1的比例结合．通过疏 sphere，Trp 收稿日期：2016-04-20．网络出版日期：2016-06-30． 准号：CXCYl629)资助． 联系人简介：杨斌盛，男，教授，主要从事生物无机化学研究．E-mail：y锄gbS@SXU．edu．ca 高等学校化学学报 水探针2一对甲苯胺基一6一萘磺酸钠(TNS)检测，铽结合后使得卵清蛋白的疏水表面暴露程度增加．化学 变性剂尿素诱导卵清蛋白解折叠实验结果表明，卵清蛋白的解折叠是一个三态过程．铽结合后使得蛋 白质稳定性增加． 1 实验部分 1．1试剂与仪器 剂有限公司，以上试剂均为分析纯． Varian—Ca