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不同寄主植物桑寄生总黄酮含量研究论文.doc
不同寄主植物桑寄生总黄酮含量研究论文
李永华 陈士林,卢栋,朱开昕,赵明惠,裴河欢,阮金兰
【摘要】 目的考察不同寄主植物的桑寄生总黄酮含量。方法采用分光光度法测定寄生在16种不同寄主植物的桑寄生样品的总黄酮含量,并用正交实验的方法研究比较了不同提取条件对桑寄生总黄酮提取率的影响。结果不同寄主植物的桑寄生茎枝的总黄酮含量为4.10~7.82 mg/g,其中以桑树为寄主的人工种植的桑寄生茎枝的总黄酮含量为最高;桑寄生叶总黄酮含量为18.33~32.08 mg/g,其中以夹竹桃为寄主的桑寄生叶的总黄酮含量最高。正交实验结果优选的提取条件茎枝是A1B2C2D3,即桑寄生茎枝0.5 g.freelin,超声提取温度为45℃,料液比1∶25;叶是A2B1C2D3,即桑寄生叶0.5 g,乙醇浓度为70%,超声提取时间为20 min,超声提取温度为45℃,料液比1∶25。结论桑寄生总黄酮含量因寄主植物不同,其总黄酮含量表现出一定的差异性。优选的提取方法稳定、可靠、简洁,提取效率高。
【关键词】 桑寄生;寄主;总黄酮
Abstract:ObjectiveTo pare the contents of total flavonoids of Herba Taxilli from different host-plants. MethodsThe total flavonoids of Herba Taxilli from sixteen host-plants ined by spectrophotometry,and the extraction efficiency of total flavonoids ental design different host-plants g/g, g/g, indicum Mill.ConclusionThe contents of the total flavonoids of Herba Taxilli from different host-plants are different .
Key 波长范围内扫描,测得对照品与样品的最大吸收波长为408 nm左右。
2.2 标准曲线的制备
精确称取105℃干燥至恒重的芦丁对照品5.03 mg,置10 ml 容量瓶中,加少量60%乙醇溶解后定容至刻度。精确吸取5 ml于10 ml 容量瓶中,加60%乙醇稀释至刻度,制成0.25 mg/ml的标准液。精确吸取标准液0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 ml,加60%乙醇稀释至1.0 ml,加0.1 mol·L-1的三氯化铝溶液2 ml,0.1 mol·L-1的醋酸钠溶液1 ml,摇匀,室温放置20min,在波长408nm测吸收度。以吸收度A对浓度C作标准曲线,回归方程为A=0.246 6C-0.004 4,r为0.999 8,表明在0.006 3~0.063 mg/ml 之间呈良好的线性关系。
2.3 总黄酮提取
工艺设计根据前期试验结果,选择乙醇浓度(A)、提取时间(B)、提取温度(C)、料液比(D)为实验因素。因素水平见表1。实验结果见表2。通过正交实验和数据处理发现,影响桑寄生茎枝总黄酮提取率的因素主次顺序为A>B>C>D,最佳提取条件为A1B2C2D3,即乙醇浓度为60%,超声提取时间为30 min,超声提取温度为45℃,料液比1∶25;影响桑寄生叶总黄酮提取率的因素主次顺序为A>D>C>B,最佳提取条件为A2B1C2D3,.freelin,超声提取温度为45℃,料液比1∶25。表1 提取工艺参数设计(略)表2 L9(43)提取工艺条件正交实验结果(略)
2.4 稳定性实验
精确吸取样品溶液2 ml,依法显色20 min后至100 min内,在波长408 nm,每隔10 min 测定1次吸收度。结果表明,显色后室温放置20~100 min内,其吸收度稳定,RSD为1.89%。
2.5 精密度实验
精确吸取样品溶液2 ml,依法显色20 min后,在波长408 nm,重复测定6次,RSD为0.66%,表明仪器的精密度好。
2.6 重复性实验
精确吸取6份芦丁标准溶液各1.0 ml,依法显色后,测定吸收度,RSD为1.37%,表明本方法的重复性好。
2.7 加样回收率
实验精确称取已知含量的桑寄生0.5 g,5份,分别加入一定量的芦丁对照品,依法测定含量,平均回收率为98.32%,RSD为1.70%。
2.8 样品制备与测定
分别称取不同寄主的桑寄生茎枝、叶各0.5 g,按照茎枝、叶的最佳提取条件进行提取,每个样品提取两次,乙醇用量为12.5 ml/次,离心分离,合并两次提取液,提取液用石油醚萃取3次除去其它色素,用相同浓度的乙醇定容至25ml。
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