无菌法培养和复壮北虫草母种技术.pdfVIP

熏 ‘簟育种驯化擎 加10(2) 龟目萄 ’ 一，；··“H一^7，鹕 无菌法培养和复壮北虫草母种技术 刘春良 (河南省邱州Iff仡闻fJ镇八馕村蚕凌，t，河南郑州450045) 关键词菌种制种技术北虫草 无菌的一乏角瓶内．每瓶放入7一10个蚕蛹 文章编号 1000-8357(2010)02--0027-021．4接种尢I辇i条件F每瓶接入a)n11．液体倚种或一试 舒f母种若接种试符l有种．采jtile种钧拌动圮箨揍．使Ij；i种’j 无菌法和瓶栽技术基本一样．区别是封瓶口的材料不一 培养辏允分接触．以便缩短发蔺lI．f删猝荫。jl：苹锊娜I|i：I帆找 样。无菌法采用棉塞或硅胶塞封口。无菌法在整个北虫荜堵养 基本一样．棉塞和纸小委随意翻动．乍’e泓J堑以r1然为准．若 周期内，生长在一个密封且透气的无菌环境中。不受外界空气 使子实体长到孢子成熟，生长中期要加入瓶内一酃分无荫水 湿度的影响，培养出的北虫草子实体也是无菌的，可直接进行 (无菌条件下)。以水位不超过培养基的表面即可．重新摩好棉 组织或孢子分离。 塞．包扎好瓶口(防止灰尘落在棉花上)。 采用仿野生的方法复壮北虫草菌株，使孢子直接落在栽 2 液体培养 培培养基上．让其自然出草，筛选出草时间较早、健壮、草根部 无白色气生菌，能代表亲本类型的草做组织分离，培养出母 2．1 液体培养基配方 土瓦淀粉109(或蕞米淀粉69)．葡 种．或让子实体长到孢子再次成熟，重复2～3个培养周期．菌 萄糖20 g．硫酸镁l g，磷酸二氧钾0．5 g。蛋白胨6-109．氯化 株得到更好的复壮，能有效复壮菌株和避免菌种退化．同时也 000 钠lg，水l ml。1：淀粉先用微萤的凉水溶解再用部分沸 是对菌株进行了简单的脱毒。该方法和传统的制种技术相比． 水溶化．最后稀释刘所需浓度．依次加入其余配料。使其充分 操作简单、快捷、成功率高，不仅适合大众品系的菌株．也适合 溶解．pH值自然．装瓶．封11．灭菌。若是批缴，t产液体菌种用 某些特殊品系的菌株和其它食用菌类。现只对常规转色品系 于栽培生产．可再加入少楚的琼脂条或加大淀粉的用壁．可增 作介绍。无菌法包括固体培养和液体培养，其技术要点简述如 大液体的枯度，使黹球体积减小．数日增多。 下，供参考： 500mL液体 2．2接种采用2500mL广口玻璃瓶．装l 培养基，灭菌后．接入菌种，用通气法或摇瓶法制得液体菌种 1固体培养 后，使其保持静置(接种后．商接静置，培育出的坶种长势不 1．1试验器材500mL三角玻璃瓶，棉塞(带有金属铝钩)． 旺)。重新养菌，待液面长满一层菌丝体后．可弛光进行出草管 报纸或滤纸．橡皮筋。 理、整个生长尉期内不用再添加．无蒲水．生长不受外界空气湿 1．2培养基