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实验九血清肌酐的测定(碱性苦味酸法)
山东医学高等专科学校《生物化学检验》教案
生生化检验实验含氮化合物测定——两点法测定肌酐 学 要 求 教学目的和要 求 掌握两点法测定肌酐的原理及操作方法。
难点:把握反应时间。 教学媒体 学生动手操作为主,课堂演示为辅 教
学
过
程 复习旧课 肌酐测定方法
讲
授
新
课 (一)原理
肌酐与碱性苦味酸试剂反应生成黄红色络合物,在500nm 处选择线性较好的两个吸光度值,与通过同样处理的标准液比较,即可计算出血中肌酐含量。
肌酐 + 苦味酸 橙红色复合物
(二)操作步骤
加入物(ml)
试剂空白
标准管
样品管
工作试剂
1.5
1.5
1.5
标准液
0.1
样品
0.1
混匀,37水浴9min,用试剂空白调零,分光光度计520nm处,读取标准管和样品管的吸光度。
(三)结果与分析
(四)注意事项
测定中,温度控制很重要,10℃以下会抑制Jaffe反应,温度升高可使碱性苦味酸溶液显色加深。 课堂提问 两点法测定肌酐为什么要严格把握反应时间? 课堂小节 两点法测定肌酐的原理及操作方法。 布置作业 简述两点法测定肌酐的注意事项。 参考书目 钱士匀主编.临床生物化学和生物化学检验实验指导.第2版,北京:人民卫生出版社,2003
碱性
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