红细胞渗透脆性检验试剂盒(一管法).docVIP

【预期用途】 适用于体外检测贫血等引起的红细胞渗透脆性病变，特别是红细胞渗透脆性降低一类的贫血症筛查。（如地贫症、严重缺铁性贫血症） 【检验原理】 贫血症者常伴有红细胞渗透脆性的改变。测定红细胞在一定渗透浓度下的溶血率，可筛查是否贫血，特别是溶血率降低引起的贫血。 【主要组成成分】 组成 由A母液（红细胞渗透脆性检测液）；B母液（终止红细胞溶血液）；C母液（红细胞溶血液）组成； 成分A母液采用氯化钠（NaCl）、磷酸氢二钠（Na2HPO4）、磷酸二氢钠（NaH2PO4）制成；B母液采用氯化钠制成；C母液采用皂素（saponin）制成。 【贮存条件及有效期】 避光贮存在2℃~8℃环境中，其保质期12个月。 A和B试验液可在室温保存，C试验液在2℃~8℃保存；试剂开瓶后有效期为3个月。 【适用仪器】 具有530波长的分光光度计；普通离心机；水浴箱。 6、【样品要求】 新鲜抗凝全血（肝素、EDTA-Na、ACD），置2℃~8℃保存。已发生溶血或有血凝块的标本为不合格样品。标本采集后，测试应在三日内完成。 【检测方法】 【试验液配制】 A试验液： 用一个100ml容量瓶（不要用量筒！），上放一个小漏斗。将A母液倒入漏斗中。用纯化水洗净装A母液的管和盖，将管内余液倒入100ml容量瓶，然后加纯化水于100ml容量瓶中，准确至100ml刻度，混匀后即为A试验液。 B试验液： 将B母液倒入100ml容量瓶中，加入纯化水100ml，混匀后，即为B试验液。 C试验液： 将C母液倒入100ml容量瓶中，加入纯化水60ml，混匀后，即为C试验液。 【实验操作】 取试管一只，加入A试验液1ml，放37℃，预热1-2分钟。 加入待测抗凝全血10μl，立刻混匀，继续放在37℃保温5分钟。 5分钟后，加入B试验液1ml。混匀，3000转/分钟，离心5分钟。 将上清液轻轻倒入1.0cm × 1.0cm的比色杯中（切勿搅动试管底的红细胞），于530nm波长读取光密度D1（以纯化水作空白对照）。（勿倒掉比色杯中的溶液） 向试管中加入C试验液0.4ml，混匀，待血液全部溶血（透明红色）后，将比色杯中已比色的溶液倒入试管中混匀。 将混匀后的溶液，倒入比色杯中，再于530nm波长比色，读取光密度D2。 按下列公式计算出溶血率百分比。 溶血 ％ = D1 ×100 ％ D2 X 1.25 【参考值（参考范围）】溶血率％ 65％为正常溶血率；55％为溶血率降低；（注 56-64％为溶血率轻度降低）。 【检验结果的解释】 正常溶血率：指红细胞渗透脆性在正常范围。 溶血率降低：指红细胞渗透脆性降低；常见于地贫或低频基因携带者、严重缺铁性贫血者，小性红细胞增多症贫血者等。 溶血率轻度降低：指红细胞溶血率不明显减低，在正常与可疑贫血症之间。 10、【检验方法的局限性】 本试剂盒仅用于红细胞渗透脆性的检测。使用非新鲜或凝血血标本，可导致结果不可靠。 11、【产品性能指标】 试剂变色或有浑浊沉淀则应判断为失效。 12、【注意事项】 1、本法对血液标本的新鲜度要求高，应采用72小时内采集的，2-8℃保存的血液进行测试。 2、所有母液放2-8℃保存。此时有结晶析出。用时，必须放在37℃加温摇动至完全溶解后才能使用。A和B试验液可放室温保存，C试验液放2-8℃保存。 3、有效期内的不同批次试剂可疑互相使用。 【参考文献】 杜传书 增瑞萍 华小云等。地中海贫血一管筛查法《一种简易筛查人群地中海贫血的方法1983年》 Sirchotiyakui S,et al. Erythrocyte osmmtic fragility test for screening of alpha-thalssemia-1 and beta-thalassemia trait in pregnancy. Int Gynaecol Obstet 2004 Panyasei S et al.A simplified screening for alpha-thalassemia 1(SEA type)using a combination of a modified osmotic fragility test and a direct PCR on whole blood lysates.Acta Haematol.108:74-78,2002 Sirichotivakul; S,et al.A comparison of the accuracy of the corpuscular fragility and mean corpuscular volume tests for the alpha-thala