FM4-64在植物病原真菌和卵菌的细胞膜及囊泡染色中的应用.pdfVIP

植物病理学报 ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA 39(4)：435-438(2009) FM4—64在植物病原真菌和卵茵的 细胞膜及囊泡染色中的应用 卢晓红 ，朱书生 ，刘西莉 (中国农业大学植物病理学系，北京 100193；云南农业大学植物病理学系，昆明6~201) Application0fFM4 4onthestainingofphytopathogenfungusand oomycete LU Xiao—hong ，ZHU Shu—sheng ，LIU Xi—li (DepartmentofPlantPathology，ChinaAgriculturalUniversity，Beijing 100193．China；DepartmentofPlantPahtology，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming650201，China) Abstract：FM4—64，akindofmembrane—selectivefluorescentdye，wasutilizedto stainthemembraneslauc- tureofBotrytiscinereana d vtophthoracapsici．TheeffectofFM4-64onhyphawasobservedunderconfo- calmicroscope．TIleresultsindicatedthathteplasmamembrna e．speta and vesiclesofhtehyphaecouldbe stainedwithFM 4—64attheconcen~afionsof1to20 ixmol／L．Th eoptimM dyeconcentrationwas6 ixmol／L forhteboht pahtogens．AthtesalTleconcentrationofFM4 4．htestainingoforganelleswasinatime—depend— entmannernadhtedifferentorganelleswerestainedindiferrenttimes．Thestainingofplasmamembranenad vesiclesshouldbecompletedin5minutes，asotherorganellesCna bestainedafter10minutes． Keywords：FM4 ；fluorescencestainnig；confocalmicroscopy 文章编号：0412-0914(2009)04-0435-04 FM4-64 【N一(3-triehtylammomiumpropy1)4- 1 材料与方法 (p-diethylaminophenylhexatrieny1)]是一种毗啶二 溴化物，属于苯 乙烯类染料uJ。FM4-64在水溶液 1．1 试验材料及设备 中基本不发荧光，染色效果稳定，并且与质膜双层 1．1．1 供试菌株 灰葡萄孢 (Botrytiscinerea)和 结合后不能被动扩散进入细胞内部，必须通过主动 辣椒疫霉 (Phytophthoracapsici)，均 由中国农业大 运输 的方式进行跨膜运输 J。目前 FM4-64已逐 学种子病理药理实验室提供。 步在动植物、微生物基因的亚细胞定位 ，胞吞胞吐、 1．1．2 供试试剂 98％FM4-64，购于 Sigma公 囊泡运输等相关研究中得到应用 。 司。 Read等人 3【曾将 FM4-64应用于模式真菌粗 1．1．3 仪器设备 激光共聚焦扫描显微镜 (Ni— 糙脉胞菌的囊泡运输模式研究中。FM4-64在植物