预苯酸脱氢酶和对羟基苯丙酮酸还原酶与野葛异黄酮的生物合成.pdfVIP

安徽农业大学学报 ，2009，36(1)：33—38 JournalofAnhuiAgriculturalUniversity 预苯酸脱氢酶和对羟基苯丙酮酸还原酶 与野葛异黄酮的生物合成 李贺勤 ，杨 华 ，张娟娟 ，宛晓春 ，方从兵 (1．安徽农业大学园艺学院，合肥230036； 2．安徽农业大学农业部茶及药用植物安全生产重点开放实验室，合肥230036) 摘 要：以野葛悬浮细胞系为研究体系，测定PPDH酶和HPPR酶活性，并对细胞生长周期中2种酶活性与野 葛异黄酮生物合成的相关性进行分析。结果表明，在野葛培养细胞 中检测到PPDH酶的活性，并能催化预苯酸生 成对羟基苯丙酮酸，由野葛培养细胞中提取的HPPR粗酶液能催化对羟基苯丙酮酸形成对羟基苯丙乳酸，从而在 野葛细胞培养体系中证实了从预苯酸经对羟基苯丙酮酸到对羟基苯丙乳酸的反应。在野葛细胞培养周期中，随着 PPDH酶和HPPR酶活性的提高，细胞培养体系中异黄酮的积累逐步增加，但异黄酮的积累滞后于酶活的提高；PP— DH酶和HPPR酶活性与野葛异黄酮生物合成间存在较高的相关性，相关系数分别为0．8812和0．8046。试验结 果为以预苯酸为前体化合物 ，经对羟基苯丙酮酸和对羟基苯丙乳酸到香豆酸的中间代谢过程的一条异黄酮生物合 成新途径的证实提供了初步的酶学研究证据。 关键词：异黄酮；生物合成；预苯酸脱氢酶；对羟基苯丙酮酸还原酶；野葛 中图分类号：Q946 文献标识码：A 文章编号：1672—352X(2009)01-0033-06 RolesofprephenatedehydrogenaseandP—hydroxyphenylpyruvatereductaseinvolved in isoflavonoidbiosynthesisincellsuspension culturesofPueraria lobata U He．qin，YANGHua，ZHANGJuan．juan，WANXiao—chun，FANGCong．bing (1．SchoolofHorticulture，AnhuiAgriculturalUniversity，Hefei230036； 2．KeyLaboratoryofTeaMedicinalPlantsandProductSafety，MinistryofAgriculture，AnhuiAgriculturalUniversity，Hefei230036) Abstract：Inthispaper．thedeterminationoftheactivitiesofprephenatedehydrogenase(PPDH)andP。 hydroxyphenylpyruvatereductase(HPPR)，andthecorrelationsbetweentheassaiesofPPDHandHPPRandisofla。 vonoidaccumulationinkudZUcellsuspensioncuhurewereinvestigated．respectively．TheresultsshowedthatPPDH activitywascheckedandPPDH crudeenzymefrom kudzucellculturecancatalyzethereactionfrom prephenateto P—hydroxyphenylpyruvate，andalsoHPPR curdeenzymecancatalyzethereactionrfomP—hydroxyphenylpyruvateto P—hydmxyphenyllactate，SOthereactionsrfom prephenatethroughP—hydroxyphenylpyurvatetoP—hydroxyphenyllac。 tatecatalyzedbythosetwoenzymeswereconfimr ed．WiththeincreaseoftheactivitiesofPPDH andHPPR inthe 1ifecycleofkudzucellculture．theaccumulatio