第六章 黄酮类合物--鉴定.ppt

第6章 黄酮类化合物 ----黄酮类的鉴定 鉴 定 一、薄层色谱法（TLC） 二、 纸色谱法（PC) 一、 薄层色谱法 一般采用吸附薄层，吸附剂大多用硅胶和聚酰胺。 （1）硅胶薄层色谱: 用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物 分离苷元常用展开剂：甲苯-甲酸甲酯-甲酸；氯仿-甲醇等。 （2）聚酰胺薄层色谱：分离含游离酚羟基的黄酮苷与苷元。 展开剂：具有较强的极性，大多含有醇、酸或水 如：乙醇－水（3：2）， 水－乙醇－甲酸－乙酰丙酮(5:1.5:1:0.5) 聚酰胺薄层 (乙醇／水） 二、纸色谱法（PC) PC适于分离各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物。 黄酮苷：一般采用双向展开 * 黄酮类化合物的检识和结构鉴定 第一相展开采用醇性展开剂 如: BAW n-BuOH: HOAc:H2O=4:1:5上层 TBA t-BuOH: HOAc: H2O=3:1:1 水饱和n-BuOH 层析行为: Rf值: 苷元单糖苷双糖苷 一般:苷元在0.70以上，而苷则小于0.7。 第二相展开采用水性展开剂 如：2~6% HOAc水溶液 3% NaCl 水溶液 HOAc:浓HCl:H2O= 30: 3 : 10 层析行为: 连接糖链越长, Rf 越大(0.5); 苷元Rf较小，有的留在原点。 A B C D A B C D 苷元 苷元 纸色谱 第I向 醇性展开剂 第II向 水性展开剂 （BAW、TBA、水饱和正丁醇） （2~8%HAc、3%NaCl、1%HCl） 正相色谱 反相色谱 固定相（水）极性 流动相 （ 有认为是吸附原理） Rf规律：极性小的化合物Rf大 极性大的化合物Rf大 苷元单糖苷双糖苷 Rf规律与左边相反 母核相同，二-OH三-OH四-OH五-OH黄酮 主要应用：苷元的分离鉴别 黄酮苷及花色素类的分离鉴别 双相色谱 * 纸层析（PC）：采用双向纸层析。苷元:平面型分子: 黄酮(醇)、查耳酮的Rf小, 几乎留在 原点不动(Rf 0.02);非平面型分子: 二氢黄酮(醇)、二氢查耳酮的Rf大,  因亲水性较强(Rf 0.10-0.30)。层析检查方法：①观察荧光,用紫外光灯照射看到有色斑点，NH3处理 产生明显的色变。②用2%AlCl3甲醇液喷雾,UV灯下呈亮黄色荧光斑点。 习题 有下列四种黄酮类化合物 A、R1＝R2＝H B、R1＝H, R2＝Rha C、R1＝Glc, R2＝H D、R1＝Glc, R2＝Rha 比较其酸性及极性的大小: 酸性( )＞( )＞( )＞( ) 极性( )＞( )＞( )＞( ) 比较这四种化合物在如下三种色谱中Rf值大小顺序: (1)硅胶TLC(条件CHCl3—MeOH 4:1展开), Rf值( )＞( )＞( )＞( ) (2)聚酰胺TLC(条件60%甲醇—水展开), Rf值( )＞( )＞( )＞( ) (3)纸色谱(条件8%醋酸水展开), Rf值( )＞( )＞( )＞( )