兽医采样、保存和送检技术.ppt

动物疫病采样,保存 及送样技术 湖北省动物疫病预防控制中心 宋 念 华 2008 . 7 动物疫病采样,保存及送样技术 湖北省动物疫病预防控制中心 宋 念 华 2008 . 7 随着畜牧业的发展,科技进步以及国际贸易的日益频繁，动物传染病也在发生变化。 同时由于人们观念的转变，衡量免疫状况，制定合理免疫程序,进行疫病监控,掌握疫病动态等都要根据监测数据来确定。 兽医实验室的工作显得越来越重要。而在动物疫病诊断、监测中，采样方法、采样部位、采样数量和样品质量直接决定诊断监测结果的准确性和监测结论的科学性。因此，对采样人员采样方法、技术都有特定的要求。 主要内容 采样一般原则 采样器械物品的准备 实验采样时机、部位和数量 采样方法 采样时注意事项 采样实例 运输保存 采样和运输过程中生物安全 采样一般原则（1） 1. 凡是血液凝固不良,鼻孔流血的病,死动 物，应耳尖采血涂片，首先排除炭疽，炭疽病死的动物严禁剖检。 2. 采样时应从胸腔到腹腔，先采实质器官做到无菌，避免外源性的污染，最后采污染的组织，如胃肠组织、粪便等。 3. 采取的病料必须有代表性，采取的组织器官应病变部位明显。采取病料时应根据不同的疫病或检验目的，采其相应血样、活体组织、脏器、肠内容物、分泌物、排泄物或其他材料。病因不明时，应系统采集病料。 采样一般原则（2） 4. 病料应在使用治疗药物前采取，用药后 会影响病料中微生物的检出。死亡动物的内脏病料采取，最迟不超过死后6小时(尤其在夏季)，否则，尸体腐败，难以采到合格的病料。 5. 血液样品在采集前一般禁食8小时。采集血样时，应根据采样对象、检验目的及所需血量确定采血方法与采血部位。 6. 采样时应对环境的影响，防止污染环境和疫病传播，做好环境消毒和废弃物的处理，同时做好个人防护，预防人畜共患病感染。 采样器械物品的准备（1） （一）器 械 1. 采样箱、保温箱或保温瓶、解剖刀、剪刀、镊子、酒精灯、酒精棉、碘酒棉、一次性注射器等。 2. 样品容器包括小瓶、玻片、平皿、离心管及易封口样品袋、塑料包装袋等。 3. 试管架、铝盒、瓶塞、无菌棉拭子、胶布、封口膜、封条、冰袋等。 4.个人防护用品 口罩、防护镜、一次性防护服、手套、鞋套、帽子等 注意：采样刀剪等器具和样品容器须无菌。 采样器械物品的准备（2） （二）采样记录用品 不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单等。 （三）保存液 阿氏液(A1severs)、30％甘油盐水缓冲液、肉汤、PBS液、双抗。 采样时机和数量 根据实验目的采取不同的样本类型，如组织、血清等；送检的样本数应满足送检目的的需要；采集的样本应具有一定的代表性。 1.诊断时 样本最好发病初期（未用药），临床症状明显期采集5只(头)以上病死和发病动物的有病变的器官组织、血清和抗凝血各10份。 采样时机和数量 2.免疫效果监测时 动物免疫后14-20天，随机采集同群动物血清样品30份。 3.疫情监测或流行病学调查时 采集血清、各种拭子、体液、粪尿或皮毛样品等，采样数量可根据动物年龄、季节、周边疫情情况估算其感染率，然后计算应采样品数量。 采集方法及技术要求 禽的采样方法 1. 翅静脉采血 ： 在翅下静脉处消毒，手持采血针，从无血管处向翅静脉丛刺入，见有血液回流，即把针芯向外拉使血液流入采血针。采血完毕用干棉球按压止血。 禽的采样方法 猪的采血方法 1. 耳缘静脉采血 2. 前腔静脉采血 (1)站立保定：保定器保定让猪头仰起，露出右腋窝，从右侧向心脏方向刺人，回抽见有回血时，即把针芯向外拉使血液流入采血针。 (2)仰卧保定：把前肢向后方拉直。一般用装有20号针头的注射器采血，其穿刺部位在胸骨端与耳基部连线上胸骨端旁开2厘米的凹陷处，向后内方与地面呈60度角。角刺入2～3厘米，当进入约2厘米时可一边刺入一边回抽针管内芯；刺人血管时即可见血进入针管内，采血完毕，局部消毒。 猪活体的样品采集 1.扁桃体采取方法 从活体采取扁桃体样品时，应使用专用扁桃体采集器：先用开口器开口，可以看到突起的扁桃体，把采样钩放在扁桃体上，快速扣动扳机取出扁桃体放离心管中，冷藏送检。 2.鼻腔拭子、咽拭子采集方法 应用灭菌的棉拭子采集鼻腔、咽喉的分泌物，蘸取分泌物后，立即将拭子浸入保存液中，密封低温保存。一般每支拭子需保存液1毫升。 猪活体的样品采集 3. 肛拭子采集方法 用灭菌棉拭子插入肛门或泄殖腔内采集其内容物和分泌物后，立即将拭子浸入保存液中，密封低温保存。一般每支拭子需保存液1毫升。 牛、羊采血方法 牛、羊颈静脉采血 将动物保定，稍抬头颈，于颈静脉沟上1／3与中1／3