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高速逆流色谱仪介绍
HSCCC-高速逆流色谱
高速逆流色谱技术(High Speed Counter Current Chromatography, HSCCC)是一种无固
体载体的连续高效的液液分配色谱分离技术,采用多层缠绕的螺旋管柱,由柱体的高速行星式
运动产生的不对称离心力场实现两相溶剂体系的高效混合、分配及充分保留,形成连续流萃取,
从而实现不同溶解分配系数的溶质在两相溶剂中的高效分离。
高速逆流色谱分离以液体为固定相,完全排除了溶质分子与固相载体之间相互作用而形成
的各种复杂状况,如固体载体与样品发生化学反应而变性,以及不可逆吸附等所造成的回收率
低、溶质色谱峰拖尾等现象,能够实现分离产物的基本完全回收,从而得到高纯度的馏分产物;
而且对于生物活性分子的分离纯化而言,液体载体避免了固液吸附解吸相变、固液流变和压力
剪切力对分子构象和活性的影响,使活性损失达到最小。
另外,液液分配分离相对固液分离而言,分离过程实际意义上并不是洗脱过程,而是对流
穿透过程,溶质分子可以渗透至色谱柱内全部体积的固定相,而不是像固液分离中仅仅吸附于
固定相的表面,因此固定相的样品容量大大提高,单次样品处理量可高数倍。同时由于节省了
昂贵的固体填料消耗和溶剂消耗,能够大大降低分离纯化的实验成本,同时能减少有机试剂的
环境污染。
而且,以液体为固定相的分离过程意味着高速逆流色谱分离技术的灵活多变的分离模式。
几乎任意两种不相溶的溶剂都能够被应用于液液分配分离当中;而不相溶的两相中任一相可以
作为固定相在色谱柱中保留,利用同一个溶剂体系实现正相分离和反相分离。更有最新的应用
研究显示,在一个分离过程中固定相和流动相可以反复交替,实现连续流逆流色谱,产生更高
的制备效率。[P Hewitson et al., Journal of Chromatography A, (2009);R. van den Heuvel,
et al., J. Chromatogr. A (2009)]
与同级别制备型高效液相层析相比,高速逆流色谱的优势包括:
高回收率
高制备量
高纯度
高活性保留
低试剂消耗
低分离成本
这些优势都是当今生物科学和现代化药物研发对分离纯化技术提出的最新需求,也是分离
江阴逆流科技有限公司
HSCCC-高速逆流色谱
领域发展的必然趋势。目前,高速逆流色谱技术正在日益广泛地被应用于生物医药,化工,天
然产物和食品工业等领域,尤其在天然产物行业中被认为是一种有效的不可替代的分离方法。
高速逆流色谱仪
目前技术最成熟并且应用最广泛的高速逆流色谱仪为J 型螺旋管行星式高速逆流色谱仪
利用充满流动溶剂的螺旋管作为分离单元 (即螺旋管分离柱,coils),在电机的驱动下围绕主
轴进行公转的同时,做同步同向的行星式自转;在这种规律变化的离心力场作用下,流过螺旋
管的互不相溶的两相溶液形成单向性的两相分布;并依其界面特征形成极微小的颗粒。当被分
离的混合物通过分离单元时,样品中各组分会在两相微粒的交界表面上充分分配,并且能在颗
粒振荡与对流的环境中于两相间有效地传递。离心旋转一周,这种分配过程就进行一个循环,
因此每分钟上千转的离心转速就意味着普通的溶剂萃取过程被成千上万次地、高效地、自动连
续地完成。不同的溶质分子将按照其在两相溶剂中分配系数的大小被顺序洗脱而实现分离。
图1:J 型螺旋管行星式高速逆流色谱仪中上下相溶剂的分布示意图。
图2:溶质按照分配系数的大小顺序洗脱。
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HSCCC-高速逆流色谱
分离专家们对传统高速逆流色谱仪器的疑虑:
产生原因 解决途径
分离时间过 流速低;提高流速会降低固定 在不损失固定相保留体积
长,可达10 小 相保留率,进一步降低样品负 的前提下,提高流速
时以上; 载量、损失分离效率。
分辨率低 固定相保留低或流失严重,造 提高固定相保留从而提高
成样品过载 柱效
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