第十二章糖的合成代谢.ppt

4．6—磷酸果糖至葡萄糖 6—磷酸果糖经酵解途径逆向变成6—磷酸葡萄糖。然后在葡萄糖6—磷酸酶的催化下水解成葡萄糖。 在肝的内质网上含有葡萄糖6磷酸酶可将葡萄糖运输到血中去，但此酶不存在于脑或肌肉中，这些组织无上述功能。 第三节 暗反应 绿色植物和光合细菌通过光合磷酸化作用将日光能转变成化学能，即NADPH的还原能和ATP的水解能，并以此促进二氧化碳还原成糖。 二氧化碳的固定和还原主要通过光合环，即Calvin循环。由于它的最初产物是3—磷酸甘油酸，是含三碳的化合物，因此又称三碳循环。 后来又发现某些热带和亚热带起源的植物中还存在着另一个固定二氧化碳的途径，称为四碳循环。 一、三碳循环(Calvin循环) 1940年Melvin Calvin在单细胞绿藻中作14CO2示踪实验。在几秒钟光照后，用乙醇停止酶的反应，以双向纸层析分离放射性产物，发现C14标记在3—磷酸甘油酸的羧基上，进—步研究发现CO2与1，5—二磷酸核酮糖缩合成6碳化合物，然后迅速裂解成二分子3－磷酸甘油酸。 催化这反应的酶是1，5—二磷酸核酮糖羧化酶（ Rubisco ）。这个酶位于类囊膜上朝基质一侧。有8个56000大亚基和8个14000小亚基。每个大亚基上有催化和调节位点，小亚基的作用不清楚。 在叶绿体中此酶的含量十分丰富，大约是总蛋白量的60％。可能它是自然界含量最丰富的酶。 三碳循环的步骤 (1)第一步是1，5—二磷酸核酮糖加CO2合成2—羧基3—酮基1，5—二磷酸核糖中间产物，然后水化形成二醇，在C3上断裂产生一个3—磷酸甘油酸和一个负碳离子，后者再质子化形成另—个3—磷酸甘油酸。 Rubisco酶催化机制是酶的特殊赖氨酸上的ε—氨基加上CO2形成带负电的氨甲酰化合物，它可与二价金属Mg2+或Mn2+形成正电中心，在催化时它似乎作为电子穴起作用。 从第二步到第八步3—磷酸甘油酸经一系列酶促反应转化成6—磷酸果糖，催化这一系列反应的酶与糖的异生途径相似，不过3—磷酸甘油醛脱氢酶在叶绿体中是以NADPH为辅基，而不是NADH， 其反应加下： 从第九步到第十四步是再生1，5—二磷酸核酮糖的步骤，由一系列转酮酶和转醛酶催化这些反应，催化酶及反应式与戊糖途径类似，反应如下： 最后是5—磷酸核酮糖在磷酸核酮糖激酶的催化下再生成1，5—二磷酸核酮糖，ATP是磷酰基的供体。 所以Calvin循环的总反应是： 二、暗反应的代谢调控 暗反应中限速步骤是由核酮糖二磷酸羧化酶催化的CO2固定反应。 此酶是别构酶，因为光照叶绿体产生的三个因素可刺激此酶的活性。 1．光照叶绿体后，H＋经基质流至类囊膜内，使基质的pH升高，经pH7到pH8，刺激酶的活性。 2．光照时质子泵入，同时伴随着Cl-1和Mg2+的转移。 Mg2+浓度的升高也刺激酶的催化活件。因为在碱性pH有利于氨甲酰的形成，由Mg2+浓度升高有利于与氨甲酰结合促进催化作用。 3．NADPH刺激暗反应，光照光系统I时产生NADPH，可以使反应加速。 4．叶绿体中几个酶可由于二硫键的还原而被活化。 还原物是硫氧还蛋白，它是一个分子量为12000的蛋白质，含有相邻的半胱氨酸残基，可氧化成二硫键，又可被铁氧还蛋白催化还原。 在光合作用中，这个蛋白有协调光和暗反应的作用，它可使磷酸核糖激酶活性升高100倍。 因此，虽然固定CO2是暗反应，但是Rubisco的活性间接的受光刺激激活而被调控，暗反应中其他的酶以及ATP合成酶也被光照叶绿体所推动。 三、光呼吸 核糖二磷酸羧化酶还有一个催化O2与二磷酸核酮糖的反应。反应产物是3—磷酸甘油酸和磷酸乙醇酸。 氧化反应和羧化反应在同一个活性位点，彼此竞争，在正常大气条件下25℃的基质中CO2为10umol，而O2为250 umol，但羧化反应活性比氧化反应活性高四倍。 3—磷酸甘油酸参加糖的合成。磷酸乙醇酸可转化成甘氨酸或在乙醇酸途径中放出CO2。 植物消耗O2将二磷酸核酮糖转化成CO2的过程称光呼吸。在这过程中，没有ATP或NADPH的生成，因此是一个浪费能量的过程。 O2可以抑制Rubisco固定CO2的活性，因为它与CO2竞争活性位点，这是Rubisco酶不完美的地方，因此现在Rubisco的基因工程就是要改造基因，使其成为没有光呼吸的酶。 四、四碳途径(Hatch—S1ack途径)