基因工程复习4—培训课件.ppt

在①过程中，首先要 用 酶切开，暴露出 ，再用 酶连接。 (2)在该基因工程中，供体细胞是 ，受体细胞是 。 (3)②过程称为 。 (4)检测修饰后的CpTI基因是否表达的最好方法是 。 黏性末端 限制性内切 水稻细胞 豇豆细胞 转录 让多种害虫吞食水稻叶片 （5）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是 和 。 （6）当前，转基因大豆，转基因棉花等已经进入了我们的生活。请你谈谈转基因农作物可能带来的利与弊。（各一条）　　　　　　　　　　　　　　　　 目的明确 培育周期短 利：可以让人类获得具有优良品质的作物，如蛋白质含量更高、抗逆性更强；打破传统育种界限，如植物表达微生物的抗虫性状。 弊：转基因农作物也可能变异成为对人类或环境有害的物种，如抗逆性极强的“超级杂草”；造成基因污染；影响食品安全。 考纲要求 三年考情 基因工程的诞生 ? 课改区高考无单独考查 基因工程的原理及技术 ∥ 2012新课标全国卷，2012山东 2012江苏，2012安徽，2012福建 基因工程的应用 ∥ 2012安徽，2012浙江，2011山东 蛋白质工程 ? 2012海南，2012天津，2011江苏 实验：DNA的粗提取与鉴定 课改区高考无单独考查 一．基因工程的概念 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 由于基因工程是在ＤＮＡ分子水平上进行操作,因此又叫做重组DNA技术。 生物体外 基因 分子水平 剪切→连接→导入→表达 产生人类需要的基因产物 基因工程是指按照人们的愿望，将一种生物的基因在体外剪切，并与特殊的运载工具进行重新组合，然后转入另一种生物的体内进行扩增，并使之表达所需要蛋白质的技术。通过体外DNA重组和转基因技术，定向地改造生物的遗传性状。 二、基因工程的基本工具 （一）“分子手术刀”— 1．来源：主要是从 中分离纯化出来的。 2．功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 3．结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 。 限制性内切酶（简称限制酶） 原核生物 磷酸二酯键 黏性末端和平末端 （二）“分子针线”——DNA连接酶 1．分类：根据酶的来源不同，可分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶两类 2．功能：恢复被限制酶切开了两个DNA片段之间的磷酸二酯键。 两种DNA连接酶(E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键 ②区别： E·coli DNA连接酶来源于大肠杆菌，只能使黏性末端之间连接； T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端之间的效率较低。 相同 区别 DNA聚合酶 都催化形成磷酸二脂键 只能将单个核苷酸连接到DNA片段上； 以一条DNA链为模板,形成互补的新DNA链。 DNA连接酶 将两个DNA片段之间形成磷酸二脂键； 将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，形成重组ＤＮＡ分子，不需要模板。 DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 注意：解旋酶：能使DNA两条链上碱基之间的氢键断开，形成两条单链。 （三）“分子运输车”——载体 （1）作用：将目的基因转移到宿主细胞内，利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 （2）载体具备的条件： ?有1~多个限制酶切点 　 ?对受体细胞无害 　　?导入基因能在受体细胞中复制、表达 　　?有某些标记基因，便于筛选。 （3）最常用的载体是--质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 （4）其它载体：λ噬菌体衍生物、某些动植物病毒 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建（核心） 3、重组载体的导入和筛选 4、目的基因的表达与鉴定 三、基因工程的基本过程 三、基因工程的基本过程 第一步：目的基因的获得 1.目的基因是指：编码蛋白质的外源基因。 2.原核基因采取直接分离法获得，真核基因是人工合成法。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。 ①直接分离法（鸟枪法）：