第7章2012516.ppt

细菌中参与信号转导的二组分调控系统。 细菌在进行转录调控时，在较多情况下，外部信号并不是直接传递给调节蛋白，而是首先通过传感器（sensor）收信号，然后以不同方式传到调节部位，这个过程就是信号转导（signal transduction）。 最简单的细胞信号系统称为二组分系统（two-component systems），由二种不同的蛋白质组成：即位于细胞质膜上的传感蛋白（sensor protein），因该蛋白质具有激酶活性，所以又称传感激酶，及位于细胞质中的应答调节蛋白（response regulator protein）。 传感激酶常在与膜外环境的信号反应过程中被磷酸化，再将其磷酸基团转移到应答调节蛋白上，磷酸化的应答调节蛋白即成为阻遏蛋白或激活蛋白，通过对操纵子的阻遏或激活作用调控下游基因表达。 多启动子调控的操纵子 rRNA操纵子 大肠杆菌rRNA操纵子（rrnE）上有两个启动子P1和P2。 在对数生长期，P1起始的转录产物比P2起始的产物多3～5倍。 当细菌处于紧急状态，细胞中ppGpp浓度增加，P1的作用被抑制。因为rRNA是细胞中蛋白质合成机器核糖体的重要组成部分，不能完全停止供应，由P2起始基因转录。因此，在贫瘠的培养基中，细胞增殖缓慢时，P2是合成rRNA的主要启动子 大肠杆菌rrnE的两个启动子（P1和P2） CsrA蛋白调控 glg mRNA的稳定性 7.7.3 核糖体蛋白对自身mRNA翻译的抑制作用 核糖体蛋白与rRNA亲和力较强，细胞中有足够的rRNA，核糖体蛋白就不会结合到自身mRNA上。 当细胞中缺乏足够rRNA时，核糖体蛋白只能结合到自身mRNA上，导致该mRNA的RBS位点被封闭，蛋白质合成停止。这种机制保证了rRNA和核糖体蛋白在数量上的平衡。 核糖体蛋白对自身mRNA翻译的抑制 7.7.4 反义RNA的调节作用 反义RNA（antisense RNA）的调节作用： 原核生物基因转录后调节的重要机制之一。 细菌因环境压力（氧化压力、渗透压、温度) 等的变化，会产生一些非编码的小RNA分子，与 mRNA中特定的序列(SD,AUG)配对,封闭了mRNA 的翻译活性；同时改变所配对的mRNA的构像，从 而导致翻译过程被开启或关闭，也可能导致相应 mRNA分子的快速降解。 mRNA intrefering complementary RNA micRNA：干扰mRNA互补的RNA 通过反义RNA控制mRNA的翻译是原核生物基因表达调控的一种方 式。 最早是在E.coli 的产肠杆菌素的Col E1质粒中发现的，许多实验证明在真核生物中也存在反义RNA。近来，人工合成反义RNA的基因, 并将其导入细胞内转录成反义RNA，即能抑制某特定基因的表达，阻断该基因的功能，有助于了解该基因对细胞生长和分化的作用。同时也暗示了该方法对肿瘤实施基因治疗的可能性。 细菌铁蛋白： bfr基因编码细菌铁蛋白，储存细胞中过剩的铁离子。 无论细胞中铁离子浓度高低，bfr基因都正常转录成mRNA anti-bfr基因编码反义RNA。而anti-bfr基因的转录却受感应铁离子浓度变化的Fur蛋白的调控。 细胞中铁离子过多时，Fur蛋白作为抑制因子起作用，关掉与铁摄取有关的众多操纵子，anti-brf基因不表达，使bfr基因能正常翻译出铁蛋白，储存过剩的铁离子。 在铁离子浓度低时，anti-bfr基因转录产生大量反义RNA，与bfr的mRNA配对，阻止细菌铁蛋白基因的翻译。 细菌铁蛋白表达的调节  7.7.5 稀有密码子对翻译的影响  7.7.5 稀有密码子对翻译的影响 有些基因的产物是细胞必需但需求量不大时，发现这些基因中有不少稀有密码子，如：lacI、TrpR、AraC基因。因细胞内对应稀有密码子的tRNA较少，高频率使用稀有密码子的基因的翻译过程易受阻，影响蛋白质的合成总量。 7.7.6 重叠基因对翻译的影响 多的遗传信息，同时可能对基因表达有调控作用 7.7.7 翻译的阻遏 复制酶作为翻译阻遏物进行调节 7.7.8 魔斑核苷酸水平对翻译的影响 R蛋白对自身蛋白合成的协调，细胞在无蛋白质合成时对RNA合成的调控。空载tRNA 实验：大肠杆菌营养缺陷型（trp-his- ）缺乏任何一种必需氨基酸，蛋白质合成下降，RNA合成也下降。此现象称为严紧控制（基因型rel+）；