植物组培中污染发生原因及防治技术研究进展 - 广东林业科技.doc

植物组培中污染发生原因及防治技术研究进展 彭立群1 田子珩1 张俊琦2* 1 北京林业大学林学院 北京 100083；2 北京林业大学公共分析测试中心 摘要: 从植物组织培养技术污染的概念和途径以及有关灭菌方法，目前常用的和最新的研究进展等方面进行归纳综述，正确地认识到污染带来的危害以及造成的原因,提出控制污染的可行途径和有效措施，强调组织培养中应严格遵守无菌操作规程，并阐明作者的见解，为科研和生产提供一定的参考。 关键词：植物组织培养 污染 防治 Research Progress in Contamination Causes and Prevention Measures in the Process of Plant Tissue Culture Pengliqun1 Tianzihang1 Zhangjunqi2 Forestry institute of Beijing Forestry University，北京，100083； Public analysis and test center of Beijing Forestry University) Abstract: This paper summarized and reviewed the concept, pathway, present and the latest researches on sterilization methods in respect of plant tissue culture. Correctly recognizing harm caused by contamination and the reasons for the formation, proposing effective ways and possible measures to control contamination, emphsizing the importance of strict compliance on the aseptic operating procedures in tissue culture, and expounding the author’s point, providing a certain reference for scientific research and production. Keywords: plant tissue culture, contamination , prevention 植物组织培养技术是二十世纪初发展起来的一门新兴技术，在科研和生产应用上拥有越来越重要的地位。但由微生物所引起的污染问题一直是制约当前植物组织培养技术发展的主要障碍，对植物种苗的规模化生产、植物试管基因库的构建、生产成本和宝贵材料保全等方面都产生了负面影响。如何解决这个问题已经引起这一领域科研人员的重视，研究微生物污染的种类、来源和消毒方法以及一些抑制剂种类和用量的筛选，对避免和减轻污染，提高培养成功率和培养物的成活率，降低成本，提高经济效益等都有重要意义[1]。 本文针对在植物组织培养中污染产生的原因及控防措施等相关问题的研究进展作出简要综述，并结合实践经验提出的一些见解，以期为从事植物组织培养研究与应用的相关人员提供一些技术借鉴和参考。 1 污染的概念和造成污染的主要原因 1.1污染的概念 植物组培污染是指植物组织材料在组培过程中因培养条件下的温度、湿度、pH值和营养条件等适合微生物的生长，从而导致在各培养环节中发生的培养体系污染。这些污染一般出现在材料表面、材料附近的培养基以及培养基的其他部位，表现为霉变或混浊或云雾状、粘液状、发酵泡沫状等不同形状、颜色和大小的污染痕迹[2]。 污染的原因 组织培养过程中的污染是研究工作者感到最棘手的问题，也是影响植物组织培养中种苗成败的关键因素。一般来说，在植物组织培养过程中，细菌污染率高于霉菌污染率，占总污染率8O%以上。大多数人认为在组培中较常见的细菌性潜在污染可能是由器具消毒不彻底，带有半致死性细菌引起。而细菌污染中的内生细菌污染情况却更为复杂，所以选择适宜的外植体材料至关重要。 屈云慧、杨春梅等[2]研究认为造成污染的主要污染源有真菌、植物病原细菌、病毒和类病毒以及螨或蓟马。真菌来源于空气，可以产生孢子，落于适当的环境中便会迅速增殖形成菌落,污染整个培养容器。植物病原细菌常分布在外植体表面或内部, 病毒和类病毒则常存在植物内部,并利用机械或载体传播。螨是一类寄生在植物或动物体上刺吸液汁或血液节肢动物，体形微小，蓟马是一种靠植物汁液维生的昆虫,喜欢吃菌丝，如果不注意培养室的卫生，则培养容器内部很容易就会受到感染。 Le