儋州市一中金兆娜概论.ppt

提问： 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 什么是动物细胞的培养？ 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 3.动物细胞生长特性： 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基） 动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 动物细胞培养应用 大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据 １、动物的克隆与植物克隆一样吗？ 概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 * 儋州市一中 金兆娜 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞工程： 植物细胞工程： 1.动物细胞培养 3.动物细胞融合 4.单克隆抗体 2.动物细胞核移植 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 人造皮肤 1.过程： 1、选材： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养。 在进行动物细胞培养时，用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 2.分散成单个细胞 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 4.如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？ 多数组织细胞固定在表面生长和分裂。 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 (遗传物质改变) 培养过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 动物细胞培养不能 最终培养成生物体 剪碎 1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ ２、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ ３、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？ ４、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？ 没有 是 成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖 先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理。 思考题 6、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ 能 思考题 ５、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考并讨论以下问题： 讨论 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ 充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境 无菌、无毒的环境。 保证细胞顺利的生长增殖 培养条件： 保证细胞顺利的生长增殖 动物细胞培养液的主要成分： 葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。 与植物培养基相比其特点是： （1）液体培养基 （2）含有血清、血浆 动物体细胞大都生活在液体的环境 培养条件： 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 获得细胞或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 克隆羊——多利 卵细胞 Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 多莉羊的培育过程 融合后的卵细胞 ２、用动物体细胞进行克隆的过程,其实际操作过程是什么？ 动物克隆过程的实际是细胞核移植 不 思考题 核移植 （难度高） 受体细胞：MⅡ期的卵母细胞 二、动物体细胞核