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血浆蛋白质及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱09本科
AAT 主要参考文献 Ingenbleek Y, DeVisscher M, DeNayer P, Measurement of Prealbumin as an Index of Protein-Calorie Malnutrition, The Lancet,1972; [July]:106-108. Y. Ingenbleek. Why Should Plasma Transthyretin Become A Routine Screening Tool In Elderly Persons? The Journal of Nutrition, Health Aging. 2009 ,13( 7):640-642. Richard P. Lifton. Individual Genomes on the Horizon. The new england journal of medicine.2010,362(13):1235-1236. David Watkins. Individual Genomes on the Horizon(a letter to the editor) . The new england journal of medicine.2010,363(2):1235-1236. /publications/cln/2009/august/Pages/series0809.aspx /issues/articles/2006-12_02.asp / 周新,涂植光. 临床生物化学和生物化学检验.第3版,北京:人民卫生出版社,2003. 郑铁生,鄢盛恺.临床生物化学检验.第2版,北京:中国医药科技出版社,2010. 尿总蛋白、微量蛋白质测定 尿蛋白相对量较低,需用灵敏度较高的方法(酚试剂法)进行检测。 CSF蛋白测定 CSF是血浆的超滤液,仅含有分子量低的蛋白质,且量微 浊度法(磺基水杨酸-硫酸钠) 染料结合法(考马期亮蓝G-250染料结合法,邻苯三酚红钼络合显色法) 氨基酸测定 自动分析法(茚三酮) 层析法 化学法 酶法 关于免疫化学测定方法中的标准品和方法的标准化问题 含有准确含量的纯抗原蛋白不易得到 制备的抗血清由于其来源不同,其特异性和灵敏度效价有很大差异 抗血清的制备和方法的标准化是方法推广和使用的关键 由于不易获得稳定的抗血清和标准化的参考蛋白质,各个实验室还不得不根据自己的条件建立自己的正常参考值 WHO可以提供以下参考标准品:IgG 、IgA、IgM、IgD、IgE、αFP、CEA、Alb、C3、CER及TRP。使用国际单位(IU),没有使用绝对的质量单位 思考题 1、蛋白质的分类有哪些方法? 2、什么是APRP?有哪些蛋白质是APRP?它们的意义如何? 3、蛋白质检测的方法有哪些?如何评价这些方法? THE END THANK YOU * * * * * 盐析法的原理:蛋白质在水溶液中稳定存在是因为其表面有水化膜和电荷,破坏其中之一都可使其沉淀。在蛋白质溶液中加入中性盐溶液破坏胶体稳定性而使蛋白沉淀的过程。一般使用硫酸铵溶液。硫酸铵在水溶液中解离,所带的电荷比蛋白质要多,所以将蛋白表面的水分子竞争过来,破坏了其表面的水化膜,使蛋白发生聚集而沉淀。因为球蛋白表面的水化膜比白蛋白少,所以用较低溶液的盐溶液可先使其沉淀,而白蛋白则留在溶液中,从而使它们分离。 * * 电泳的发展从滤纸、薄层、胶体不断发展,其分辨率和敏感性不断提高。现在临床用的较多的是醋酸纤维膜,分辨率较好的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,因为其具有分子筛作用。蛋白种类烦多,不同种类的蛋白性质有一定的差别,如分子量,肽链的长短或支链的多少等,其直接影响就是电泳迁移率会有差别。 蛋白是两性物质,在不同的缓冲液中会带上不同的电荷,一般在CAM电泳中,用的缓冲液PH为8.2左右。体液中各种蛋白的等电点均小于8.0,所以都会带上负电荷。 * * * * * 在血清中含量最多的蛋白,在肾小球有微量滤过,但大部分被肾小管重新吸收,故尿中几乎没有。肾小球对蛋白的滤过有选择性,只滤过分子量较小的蛋白,如白蛋白,其余大分子量的蛋白不被滤过,使尿中不出现大分子蛋白,此称为选择性蛋白尿,此概念将在肾功能章节中有详述。 营养功能主要是白蛋白可能提供各种组织在合成和修补时需要的氨基酸。 血浆胶体渗透压则因为白蛋白是血清中主要的固体物质。 缓冲功能则表现在白蛋白是两性物质,主要是其含有-NH2和-COOH基团,在不同的PH环境下可以带上电荷和失去电荷。 载体功能主要表现在可以结合一些水溶性差的物质,如胆红素,药物,有害的金属离子等,使它们的脂溶性减弱而不能经过生物膜,并且转运到代谢的场所如肝脏进行代谢,对于有害物质,这个过程也可以叫作是解毒。 临床意义主要
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