心肌型脂肪酸结合蛋白胶体金检测试纸条的制备和初步应用.pdfVIP

微生物学免疫学进展 2013年 12月第4l卷第6期 ProginMicrobiolImmunol，Dec．2013，Vo1．41No．6 ·35 · · 论 著 · 心肌型脂肪酸结合蛋 白胶体金检测试纸条 的制备和初步应用 彭林峰，罗广，席仲兴，袁皓加，张正雷，潘宪云，路东，金红燕，陈国怀 (兰州生物制品研究所有限责任公司 甘肃省疫苗工程技术研究中心，兰州 730046) 摘要：目的 应用胶体金免疫层析法制备检测全血或血清样本中心肌型脂肪酸结合蛋 白(H-FABP)的检测试纸 条，用于急性心肌梗塞 (AMI)的早期辅助诊断。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，标记鼠抗心肌型脂肪 酸结合蛋白单克隆抗体 ，喷于玻璃纤维膜上制成胶体金结合物垫，将另一株鼠抗心肌型脂肪酸结合蛋 白单克隆抗 体和抗鼠二抗分别包被检测线和质控线，组装成试纸条进行灵敏性、特异性、精密性、稳定性及临床样品检测。结 果 该试纸条的检测灵敏度为 10ng／mL，15min内可判定结果；与肌钙蛋白I、C反应蛋白、肌酸激酶、人心肌肌红 蛋白无交叉反应。检测240份临床标本，与临床诊断结果进行配对分析，阳性符合率95．83％、阴性符合率 100％、 总符合率97．92％。结论 制备的H-FABP检测试纸条有良好的灵敏性、特异性，可用于早期 AMI的辅助诊断。 关键词：心肌型脂肪酸结合蛋白(H—FABP)；急性心肌梗塞(AMI)；胶体金免疫层析 中图分类号：R392—33 文献标志码：A 文章编号：1005．5673(2013)06—0035-05 Preparationandprelim inaryuseofagold immuno-chromatography assaytodetecttheH．FABP PENGLin·feng，LUOGuang，XIZhong—xing，YUANHao-jia，ZHANGZheng—lei，PANXian—yun， LUDong，JINHong—yan，CHENGuo—huai (LanzhouInstituteofBiologicalProductsCo．，Ltd．，CenterforC,ansuProvincialVaccine EngineeringResearch，Lanzhou730046，China) Abstract：Objective Todevelopthedetectionkitofhumanheart—typefattyacidbindingprotein (H—FABP)fromthe wholebloodorserum samplesusingcolloidalgoldimmunochromatographytechnology，fortheearlydiagnosisofacutemyo- cardialinfarction(AMI)．Methods Thecolloidalgoldwasobtainedbytrisodiumcitratereductionmethod．Colloidalgold particleslabelledwithmonoclonalantibodyofH—FABPwereusedasthedetectorreagentandcoatedonsomeglassfiberand dried．TheothermonoclonalantibodyofH—FABPandpurifiedanti—mouseIgGwereblottedonthetestlineandcontrolre— gionsofnitrocellulosemembrane．Then thestripwasfinishedandthedetectionsensitivity，