第三章酶why1.ppt

酶的聚集方式 1、松散排列 酶在细胞中各自以可溶的单体形式存在，彼此没有结构上的联系。 反应时酶是随机扩散，催化效率不高。（如糖酵解历程） 2、簇式排列 几种酶有机地聚集在一起，精巧的镶嵌成一定的结构，定向转移，形成多酶复合体。催化效率高。 【举例】丙酮酸脱氢酶复合体 脂肪酸合成酶复合体 3、与生物膜结合 一种结构更高的多酶复合体，酶整齐的排列在生物膜上。催化效率最高。（如呼吸链） 酶的结构 1．结合部位 Binding site 酶分子中与底物结合的部位或区域一般称为结合部位。 2．催化部位（catalytic site） 酶分子中促使底物发生化学变化的部位称为催化部位 通常将酶的结合部位和催化部位总称为酶的活性部位或活性中心 结合部位决定酶的专一性 催化部位决定酶所催化反应的性质 酶分子中存在着一些可以与其他分子发生某种程度的结合的部位，从而引起酶分子空间构象的变化，对酶起激活或抑制作用。 高效性 特异性 易失活 酶活性的可调性 诱导契合机制 B.诱导契合 C.产物脱离 研究酶促反应速度及其影响因素。 （一）米－曼氏方程式 中间产物 （三）Ｋm值与Ｖmax值的测定 1. 双倒数作图法(double reciprocal plot)，又称为 林-贝氏(Lineweaver- Burk)作图法 二、 酶的共价修饰调节 共价修饰(covalent modification) 在其他酶的催化作用下，某些酶蛋白肽链上的一些基团可与某种化学基团发生可逆的共价结合，从而改变酶的活性，此过程称为共价修饰。 应用：磺胺类药物作用机理 NH2 SO2 NHR NH2 COOH （对氨基苯甲酸，合成 二氢叶酸的底物） （磺胺类药物） 细菌 对氨基苯甲酸 二氢叶酸合成酶 叶酸 核苷酸 磺胺类药物 人体 可从食物摄取叶酸，核酸的合成不受磺胺药物影响，但服药时需维持较高的药物浓度才有疗效。 2. 非竞争性抑制（noncompetitive inhibition） * 反应模式 E+S ES E+P + I EI+S EIS + I 非竞争性抑制的动力学方程: 1v = Km Vmax (1+ ) + [I]Ki 1 [S] 1 Vmax （1+ ） [I]Ki 非竞争性抑制的特征曲线： 1v 正常 ? [I] 1 [S] -1 Km 1 Vmax (1+ ) [I]Ki Vmax↓ Km不变 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系； 抑制程度取决于抑制剂的浓度；与底物浓度无关 动力学特点：Vmax降低，表观Km不变。 非竞争性抑制的特点： ３. 反竞争性抑制 * 反应模式 E+S E+P ES + I ESI 反竞争性抑制的动力学方程: v= Vmax[S] Km +(1+[I]/Ki) [S] 1v = Km Vmax (1+ ) [I]Ki 1 [S] 1 Vmax 反竞争性抑制的特征曲线： ? [ I ] 正常 1v 1 [S] 1 Vmax -1 Km [I] Ki + (1+ ) -1 Km 1 Vmax (1+ ) [I] Ki 1、I与S分子结构不同, I只能结合ES，不结合E ，S与E的结合有利于I的结合。 ESI不能生成产物， I 存在时〔ES〕↓，V↓。 2、I存在增加E与S的亲和力（Km↓） 3、抑制作用只与〔I〕成正比而与底物浓度无关（Vmax↓） 4、Vmax 和表观Km都减小 反竞争性抑制的特点： 各种可逆性抑制作用的比较 作用特征 无抑制剂 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 与I 结合的组分 E E、ES ES 动力学参数 表观Km Km 增大 不变 减小 最大速度 Vmax 不变 降低 降低 林-贝氏作图 斜率