人类疾病的模式生物学—培训课件.ppt

2012/4/16 * 医学遗传学国家重点实验室 State Key Lab of Medical Genetics 实验室网址： 黑腹果蝇——打开诺贝尔奖大门的金钥匙 Morgan 遗传学之父 1933年诺贝尔医学或生理学奖 —— 从果蝇白眼突变到染色体的基因之谜 Muller 果蝇突变大师 1946年诺贝尔医学或生理学奖 —— X射线诱发果蝇突变 Lewis Volhard Wieschaus 1995年诺贝尔医学或生理学奖 —— 果蝇胚胎发育 胚胎发育的秘密 胚胎如何由一个细胞发育成特化器官？？ 受精卵 特化器官 畸形个体 完美个体 细胞分裂 正常发育 基因突变 分裂、发育 果蝇揭示的“秘密” BX：「双胸」突变果蝇 基因的功能与身体发育有关 「同源异型转变」（homeotic transformation）：将身体一部分构造变为另一相似构造的转变。造成这类转变的基因就称为同源异型基因（homeotic gene）。 果蝇揭示的“秘密” 黑腹果蝇（Drosophila Melanogaster） 应用： 癌症 神经退行性疾病 （药物筛选，遗传操作） 行为学 免疫 衰老 多基因遗传 “彩虹大脑” UAS/GAL4 系统 Polyglutamine disease (Poly Q) CAG重复数目异常 异常蛋白质累积 神经元正常功能受损 运动障碍 Huntington舞蹈症 (HD)，延脊肌萎缩症 (SBMA)，脊髓小脑共济失调1,2,3,6,7,17(SCA) ，齿状核红核苍白球丘脑底核萎缩 (DRPLA) HD果蝇模型 SCA3果蝇模型 Row1 a 野生型果蝇；b Q78强表达；c Q78弱表达；d Q61强表达 Row2 视网膜厚度 HSP70改善SCA3果蝇的神经退行表型 a 表达Q78 b 共表达Q78与HSP70 c HSP70（显性负效应） d 共表达HSP70（显性负效应）与HSP70 小鼠Mouse – Mus musculus 小鼠（Mus musculus） 使用量最大、研究最详尽的哺乳类实验动物 主要优点： 生长最快的哺乳动物，成熟早、繁殖力强 体型小，容易饲养，易于控制 拥有大量的近交系、突变系和封闭群 对外来刺激极为敏感 与人类高度同源（85%基因） 基因组测序已经完成（2002年） 20对染色体 基因组大小约为2.6 Gb 约24,000 基因 小鼠生活史 小鼠（Mus musculus） 应用： 研究一个基因的功能 建立人类疾病研究模型（遗传操作，药物筛选） 肿瘤 器官移植 免疫学 内分泌 衰老 学习记忆 肥胖/糖尿病小鼠 两种：ob/ob和db/db，分别是leptin配体和受体缺陷； 肥胖、高血糖、胰岛素耐受。 肿瘤移植小鼠 转基因小鼠 FXS Vs FXTAS FXTAS小鼠模型 CGG KI小鼠泛素阳性核内包涵体 A 100周龄CGG KI小鼠，白箭头示小脑浦肯野细胞，黑箭头示小脑粒状细胞 B 72周龄CGG KI小鼠，黑箭头示室管膜细胞 C 91周龄CGG KI小鼠，黑箭头示室管膜细胞 泛素阳性核内包涵体 （杏仁体内） A、C 72周龄(CGG)100 KI小鼠 A 低倍镜 C 高倍镜 B、D FXTAS患者[(CGG)105 ] B 低倍镜 D 高倍镜 基因敲除小鼠的“诞生”（1989年） ① 从供体小鼠的胚胎中提取出胚胎干细胞； ② 利用基因打靶技术，对外源DNA的特定基因进行修饰或抑制其活性，再将之引入胚胎干细胞，培养这种吸收了外来基因的胚胎干细胞； ③ 经过修饰的干细胞被注入胚泡中，再将胚泡置入代理母亲的子宫，这时出生的小鼠就是一种嵌合型小鼠，即拥有正常遗传的细胞，也拥有经修饰的细胞； ④ 将嵌合型小鼠与正常小鼠交配，所出生的基因打靶小鼠，每个基因都含有正常基因和经修饰的基因。 Mario Capecchi Oliver Smithies Martin Evans 2007年诺贝尔医学或生理学奖—— 基因敲除小鼠 基因敲除小鼠原理 常规基因敲除 Conventional knockout 在胚胎干细胞中敲除特定基因。操作相对简单，但有些基因的常规敲除会导致胚胎致死，因而不能研究基因在成体中的功能。 条件基因敲除 Conditional knockout 在特定的时间或组织中敲除特定基因。操作较为复杂，理论上可以研究基因在特定时间或组织中的功能。 大鼠Rat – Rattus norvegicus 大鼠（Rattus norvegicus） 科学研究所使用的模式生物有95%为大鼠和小鼠 主要优点： 第一种用于科学研究的哺乳动物 生长迅