侵袭性真菌感染的实验诊断-—培训课件.ppt

LOGO 毛霉的菌落形态 LOGO 毛霉菌 曲霉菌 构巢曲霉菌 黑曲霉菌 马尔尼菲青霉 黄曲霉菌 土曲霉菌 烟曲霉菌 杂曲霉菌 根霉 LOGO 根霉菌（国内报告病例不多） 米根霉 LOGO 镰刀菌的特征 双相真菌 粗球孢子菌 组织胞浆菌 副球孢子菌 皮炎芽生菌 * * 086. Screening test for the identification of C. albicans. Production of germ tubes by C. albicans in serum or plasma after 2-3 hours incubation at 37OC. Note characteristic germ tubes. * * * * 根霉菌 曲霉菌孢子是链状的，成熟后脱落，2~5μm，易在空气中悬浮。 经空气吸入孢子致病，与定植无关。 曲霉鉴定主要依靠形态学特征 血清学试验：G试验，GM试验。 分子生物学诊断：同念珠菌属。 包括: 菌落颜色，分生孢子梗形态、颜色，产孢结构数目，顶囊形态等。 烟曲霉耐高温，40℃（38.5~50℃）生长良好。 半乳甘露聚糖抗原检测（GM试验） 曲霉半乳甘露聚糖抗原 b1,6 glucans b1,3 PPL bilayer chitin ergosterol b1,3 glucan synthase mannoproteins GM 抗原 乳胶凝集试验（Pastorex?） (15 ng/ml) 酶连免疫吸附试验（Platelia?） (1 ng/ml) 灵敏度（%） 特异度（%） LA 25-70 90-100 ELISA 50-90 80-90 Sabetta et al. JID 1985; 152: 946 Ansorg et al. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 1994; 13: 582 Verweij et al. JCM 1995; 33: 3150 Maertens et al. Blood 2001; 97: 1604 Herbrecht et al. J Clin Oncol 2002; 20: 1898 GM抗原检测原理 曲霉galactomannan antigen 大鼠EBA-2单克隆抗体 双抗夹心法 b1,6 glucans b1,3 PPL bilayer chitin ergosterol b1,3 glucan synthase mannoproteins GM试验 敏感度为0.71，特异度为0.89 血液系统恶性病，敏感度和特异度分别为0.7和0.92 骨髓移植患者，敏感度和特异度分别为0.82和0.86 实体器官移植患者，敏感度为0.22，特异度为0.84 成人敏感度和特异度分别为0.62和0.87 儿童敏感度和特异度分别为0.89和0.85 ,文章较少（仅有2篇），但是呈现出较高的敏感度和特异度。 假阳性 哌拉西林/他唑巴坦 Gluconate 与其它的细菌或真菌成分有交叉反应 皮炎芽生菌、黑孢霉、拟青霉、产黄青霉、马尔尼菲青霉、粉红单端孢、头状地霉等 肠道中定植的曲霉释放GM进入血液循环 谷类食物中的GM抗原 曲霉感染检测的影响因素 半乳甘露聚糖在血中存在时间短，建议： 高危人群每周至少检测2次 结合影象学、培养结果综合分析诊断 结果判定标准 界值的确定 抗真菌治疗情况 GM试验 试剂盒推荐界值为1.5时 灵敏度为64.7%, 特异度为93.5% 连续2次1.5为阳性 灵敏度为63.6%，特异度为85.7% 临床皮肤科杂志，2005，34（12）：816-817 中华内科杂志，2006，42（12）：992-995 GM试验 对于46例造血干细胞移植后患者的167份血样进行GM抗原的测定，发现以单次测定大于1.0，或者连续2次大于0.8为阳性标准，试验的灵敏度和特异度均较高，根据上述界值，该试验的灵敏度为81.8%，特异度为93.3%。 中华医学杂志，2007，28（2）：83-86 GM界值 FDA将界值定为0.5 界值从1.5降到0.5 敏感度从76.3%升到97.4%----- 21% 特异度从97.5%降到90.5%----- 7% 连续2次I0.5,阳性预测值更好 Clin Infect Dis. 2007 抗真菌治疗的影响 确诊侵袭性曲霉病的造血干细胞移植 未接受抗真菌治疗，GM试验敏感度87.5% 接受抗真菌治疗，敏感度为20% 治疗开始后半乳甘露聚糖的测定值会下降，未见下降意味着治疗失败 应用卡泊芬净后，半乳甘露聚糖值会出现升高 BG检测( 阳性界值为60pg/mL)和GM（