眼睑基底细胞癌组织中p53基因表达的研究.pdfVIP

Journal of Mathematical Medicine Vo1．21 N0．2 2008 文章编号：1004-4337(2008)02-0184-02 中图分类号：R394．2 文献标识码：A ·临床科研分析 ． 眼睑基底细胞癌组织中p53基因表达的研究 陈华新 喻小红 李培安一 (广州军区武汉总医院眼科 武汉430070) 摘 要： 目的：探讨眼睑基底细胞癌组织中p53基因的表达。方法：收取武汉大学人民医院病理科1999~2oo6年收集的手术 切除及活检的基底细胞癌(basalcell carcinoma，IK：C)标本共4O例，另取癌周围组织5例作对照。基底细胞癌发病年龄20~68岁。 根据细胞分化程度，将BCC分为分化型(角化型、囊样型、腺样型)和未分化型(实体型、色素型、浅表型、硬化型)，其中BCC分化型22 例，未分化型18例。将基底细胞癌和正常组做免疫组织化学染色，观察各组细胞内p53基因表达的变化。利用HPIAS-2000图像分 析系统测定p53基因在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果：基底细胞癌组织中p53基因呈高表达，癌旁组织中 p53基因呈低表达。图像分析结果显示，基底细胞癌组织与癌旁组织之间p53基因的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义 (PO．01)。结论：p53基因在肿瘤的发生发展中起了重要的作用。 关键词：眼睑；基底细胞癌；p53基因 眼睑基底细胞癌(basal cell carcinoma，BCC)是眼睑恶性 新生物有限公司)；显色试盒及多聚赖氨酸(北京中山生物技 肿瘤中最常见的一种，虽然其发病缓慢，恶性程度和转移性较 术有限公司)。 低，但发病人数的逐年增多，已引起人们高度重视。研究显 1．1．3 主要仪器 YWY781型医用微波仪(250 W，50 Hz)， 示，多种癌基因的异常表达在眼睑BCC的发生发展过程中有 浙江临安电子器材厂生产；家用高压锅。 着重要作用。研究癌相关基因在BCC发生、发展及转移机制 1．2 方法 中的作用，对于揭示BCC的生物学行为与探索有效的防治方 1．2．1 常规HE染色 取材、固定、脱水、透明、切片和HE 法具有重要意义。 染色。 P53基因有野生型(wild-typep53，wtp53)和突变型(mu— 1．2．2 免疫组织化学S-P法检测p53抗原 主要步骤：组织 tant-typep53，mtp53)两种，wtp53可参与细胞周期的调控，在 切片5 m，常规脱蜡至水，蒸馏水洗；3 过氧化氢，3TC孵育 维持细胞增长、抑制肿瘤增殖过程中起重要作用。当其转变 10 m．in以抑制内源性过氧化物酶活性，PBS洗4x 5min；p53 为mtp53时，则失去对细胞生长的抑制作用，促进细胞转化和 采用微波抗原修复(3档，10 min)，PBS洗4×5rain；正常羊血 过度增殖，导致肿瘤的发生L10]。 清37K2孵育10 rain以减少非特异性反应；一抗37C孵育1 h， 本实验采用免疫组织化学方法观察了p53基因在眼睑基 PBS洗4×5min；生物素标记的二抗，37C孵育10 rain，PBS洗 底细胞癌组织中的表达，探讨p53基因在眼睑基底细胞癌组 4X5rain；链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶复合物37C孵育 织中的作用机制，旨在为临床上进一步探讨眼睑基底细胞癌 10 rain，PBS洗4×5mira 显色液显色，自来水冲洗终止 发生、发展的确切机制提供理论依据。 反应；苏木精复染，脱水，透明，封片。用PBS代替一抗作为阴 性对照。 1 材料与方法 1．3 免疫组织化学结果判断 1．1 材料