BMp-2对卵巢癌细胞生长、浸润能力影响和机制的研究.pdfVIP

·中文论著摘要· BMP一2对卵巢癌细胞生长、浸润能力的影响及 机制研究 目 的 卵巢癌患者的死亡率在女性生殖系统恶性肿瘤中居首位，且发病率逐年增高， 而其术后5年存活率一直徘徊在20％40％左右。究其原因主要是由于缺乏早期症 状，大部分患者就诊时已是晚期，存在广泛转移，而至今卵巢癌的病因及浸润、 转移机制仍不清，因此对其进行研究，以寻找新的治疗方案至关重要。 目前认为肿瘤的发生是一个多基因参与的、多因素介导的过程，随着研究的 深入，越来越多的相关因素逐渐被大家所认识与接受。近年来，骨形态发生蛋白 (Bone Morphogenctic 转化生长因子．J3(TGF．13)超家族，最初是作为能够在体内诱导骨和软骨形成的因子 为人们所认识的，现在研究认为，它们参与调节许多种细胞的增殖、分化和凋亡 的生物学过程。BMPs需与受体结合发挥作用，其受体包括两种膜结合丝氨酸／苏 氨酸激酶受体，BMPs通常先与II型受体结合，接着II型受体磷酸化I型受体，然后受 复合体转入细胞核参与基因转录，从而实现BMPs信号向靶基因的传递过程。现已 的作用具有双向性，在一部分肿瘤中，BMP．2可以通过介导肿瘤细胞凋亡、阻断 细胞周期来抑制肿瘤细胞的增殖、生长。其具体机制较复杂，如可通过增加抑癌 活性等途径引起肿瘤细胞凋亡；也可通过增加部分肿瘤细胞的P21、P27的表达， 而抑制cyclinDl、CDK2等的活性，从而阻断细胞周期，抑制细胞的增殖生长。而 在另一部分肿瘤中，BMP一2可以通过与VEGF共同作用刺激肿瘤新生血管形成，促 进肿瘤生长，也可以通过增强细胞周期蛋白如CDK4等的表达，从而使细胞周期缩 短，促进细胞增殖。 众所周知肿瘤的最主要特点是其具有浸润和转移特性，这也是目前其难以治 愈的主要原因，而有研究表明，BMP．2能使部分肿瘤细胞迁移特性明显加强，并 且高表达转移相关基因BCSGl，从而增强部分肿瘤的浸润能力。而在部分肿瘤中 又可以通过下调姗s等活性来降低肿瘤细胞的浸润能力。 由此可见，BMP．2能通过对肿瘤细胞的增殖、浸润能力的调节来影响部分肿 瘤的生物学行为，但其在卵巢癌中的表达情况、对卵巢癌细胞的影响方式以及作 用机制仍不清楚。本研究将检测BMP．2及其受体在卵巢癌中的表达情况，分析其 与卵巢癌患者预后的相关性，并对BMP．2对卵巢癌细胞生长及浸润能力的影响及 影响机制进行研究，以期为卵巢癌的治疗提供新的思路。 实验方法 一、检测BMP．2及其受体在上皮性卵巢癌组织中的表达情况 1、应用免疫组化方法检测1997年2001年手术的上皮性卵巢癌组织石蜡标 BMP．2及其受体对卵巢癌患者术后5年存活率及生存时间的影响。 2、应用RT-PCR方法检测上皮性卵巢癌组织、卵巢良性病变、正常卵巢组织 和H0891 mRNA表达情况。 3、Western-Not方法检测上皮性卵巢癌组织、卵巢良性病变、正常卵巢组织 白表达情况。 二、BMP．2促卵巢癌细胞株H08910凋亡的实验研究 l、培养上皮性浆液性卵巢癌H08910细胞株。 2、MTT方法检测BMP．2对H08910细胞生长情况的影响。 3、Annex．in 的影响。 4、Hoechst 变化。 2 表达变化情况 6、Western 白表达变化情况 三、BMP．2抑制卵巢癌细胞株H08910浸润能力的实验研究 l、培养上皮性浆液性卵巢癌H08910细胞株。 2、Cross．fiver实验观察BMP．2对H08910细胞迁移特性的影响。 3、细胞粘附实验观察BMP．2对H08910卵巢癌细胞粘附能力的影响。 响。 mRNA表达变化情况。 6、Western 蛋白表达变化情况。 实验结果 II、BMPRI l、免疫组化检测及回顾性分析发现BMP．2、BMPR B阳性表达 者其术后5年存活率明显高于阴性表达者，且其平均存活时间明显长于阴性表达 I 者。而BMPRA与卵巢癌患者的术后5年存活