IP6对人肝癌细胞HepG2细胞周期及相关调控因子影响.pdf

I P6对人肝癌细胞HepG：细胞周期及相关调控因子的影响 摘 要 目的：研究肌醇六磷酸(Inositol Hexaphosphate，IP6)对人肝癌细胞HepG2 细胞周期及相关调控因子的影响，并探讨其抑制人肝癌细胞株HepG2生长的机制， 为IP6抗肿瘤作用的应用开发提供理论依据。 方法：将实验组分为低剂量组(I．0mmol／L)、中剂量组(2．0retool／L)、高剂 量组(3．0 未经IP6作用的相同培养时间的HepG2细胞株作为对照组并进行以下实验研究： 1应用流式细胞仪检测经不同浓度IP6作用24h对HepG2细胞的细胞周期的影响； 2应用免疫细胞化学法检测I 达的影响； inDl、CDK4 mRNA表达的影响。 3应用RT-PCR法检测IP6对HepG2细胞内cycl 结果：l流式细胞术检测结果显示，同对照组比，经IP6作用处理的HepG2细胞的 细胞周期发生G。期阻滞(p姐05)。 2免疫细胞化学实验结果显示，与对照组相比，各IP。浓度组均能抑SJJcyclinDl 的表达(F=225．02，q=15．20—25．35，pn05)，并且随着剂量的增加，各IP。组 和p27的表达(q=8．52—21．00，p现砌逐渐升高。 3、RT-PCR实验结果显示，与对照组相比，各IP6作用组cyclinDlmRNA的表达 (F=672．34，q=16．41--41．99，p现砌和CDK4mRNA的表达(卢108．35，q=5．32— 16．27，p锄鲫均降低，并且随着剂量的增加，各IP6作用组cyclinDlmRNA的表达 (q：lO．25—25．62，p现砌和CDK4mRNA的表达(萨3．32一10．95，p锄砌逐渐降 ’ 低。 结论：1IP。抑制人肝癌细胞株HepG2的生长是通过影响细胞周期及相关调控因 子而实现的： 2IP6可通过细胞周期发生G。期阻滞抑制人肝癌细胞株HepG2的生长 3IP6可通过调控细胞周期因子的表达，使细胞周期阻滞于G。期：IP6可能通过降低 产物磷酸化，使E2F活性降低，DNA的合成受到抑制，使细胞周期阻滞于G。期：IP6可能 可能通过上调水平Rb蛋白，增强Rb蛋白和E2F的结合，使细胞周期阻滞于G。期。 硕士研究生：李馨(营养与食品卫生学) 导 师：宋扬教授 关键词：肌醇六磷酸；肝癌；HepG2细胞；细胞周期 EffectsofInositol cell andrelated Hexaphosphate(IP6)oncycle human cellline factorsin heptomaHepG2 Regulatory Abstract theeffectsandmechanismsof oncell andrelated Objective：Toinvestigate IP6 cycle factors ofhuman cellline the regulatoryproteinexpression heptoma HepG2．Explore inhibitionofhuman cellline mechanismfortheanti—tumor growth hepatoma He