EGCG对原代培养海马神经元电压门控钾通道影响.pdfVIP

摘要 摘 要 表没食子儿茶素没食子酸酯 （EGCG ）是绿茶的主要成分。近年来因其具有 抗氧化、抗炎症、减肥、抗癌等功效而受了广泛关注。但是随着研究的进展发现 高浓度的 EGCG 在培养的海马细胞及离体脑片中会引起一些毒副作用，这些副 副作用可能与电压门控通道有关。为了进一步探讨高浓度 EGCG 对电压门控通 道的调节作用，我们研究了 EGCG 对原代培养的海马神经元电压门控钾通道的 影响，主要观察了EGCG 对瞬时外向钾电流IA 和延迟整流钾电流IK 的调节作用。 运用全细胞膜片钳技术，我们研究了 EGCG 对瞬时外向钾通道和延迟整流 钾通道的电流-电压曲线、激活曲线、失活曲线的影响。我们的数据显示： （1）不同剂量的EGCG 可以明显抑制IA 、IK 钾电流的幅度，并且具有浓度依赖 性，其半数抑制浓度IC50 分别为251.70±37.47μM 和181.8±9.33μM。 （2 ）EGCG 对IA 、IK 的抑制作用具有电压依赖性，随着电压向去极化方向移动 抑制作用增强。 （3 ）EGCG 使IA 和IK 的稳态激活曲线向超极化方向移动，使得通道更容易在较 负的电位下被激活，其半数激活电压V1/2 分别移动了11.7mV 和6.4mV 。 （4 ）EGCG 使IA 和IK 的失活曲线向超极化方向移动，半数失活电压V1/2 分别移 动了20.72mV 和 14.86mV。而失活曲线的左移表明，在某一电位下可激活 通道数目减少，这可能是EGCG 使钾电流变小的原因。 （5 ）将激活和失活曲线左移程度进行比较，可以观察到EGCG 对 IA 和 IK 失活 曲线的影响要大于激活曲线的影响。EGCG 使钾通道激活和失活电压范围 变窄，从而使可激活的通道数目减少，引起电流的下降。 （6 ）将 EGCG 对 IA 和 IK 影响来看，不论是激活曲线还是失活曲线的移动程度 都是IA 的变化要大于IK 的。这个可能是EGCG 作用于IA 、IK 通道方式不同 造成的。 在神经系统中，电压门控钾电流对于神经元的兴奋性和动作电位的恢复具有 重要的作用，钾通道功能异常会导致神经元发放特性的变化和异常放电。我们的 研究表明高浓度EGCG 对原代培养的海马神经元电压门控钾通道IA 和IK 的激活 和失活都有较明显的作用。这提示我们在将 EGCG 应用于减肥、抗癌、抗炎症 的时候要注意到EGCG 对于电压门控通道的影响。 关键字：EGCG ；瞬时外向钾电流；延迟整流钾电流；全细胞膜片钳；海马 1 ABSTRACT ABSTRACT It is reported that Epigallocatechin-3-gallate (EGCG), one of the major tea catechins, has various beneficial effects, including antioxidant, anti-inflammation, anti-obesity, anti-cancer and so on. But recently studies in cultured hippocampal cells and brain slice found that high dose EGCG exerted certain kinds of side effects, which may relate to the voltage-gated channel. In order to further study the possible side effects caused by high dose EGCG in the central neural system, we investigate the