MicroRNA-192基因沉默对A375恶性黑色素瘤细胞增殖影响实验的研究.pdf

中文摘要 MicroRNA．192基因沉默对A375恶性黑 色素瘤细胞增殖影响的实验研究 摘 要 小分子RNA，是内源性的调控基因，通过结合靶基因从而抑制靶基因的 翻译或降解靶基因来发挥其作用。microRNA对肿瘤发生、发展的影响， 是目前研究的热点之一，有望成为一种对肿瘤诊断和治疗的靶点。 恶性黑色素瘤(malignant 恶性肿瘤的第三位(6．8％～20％)，其恶性度高、转移早，预后差，死亡 率高。本实验应用基因芯片技术对A375恶性黑色素瘤细胞进行了分析， 显示microRNA．192基因在恶性黑色素瘤细胞中高表达，本研究以 的作用。 定基础。 方法： 1细胞培养 的培养箱内进行常规传代培养。 2在倒置光学显微镜观察A375恶性黑色素瘤细胞分化及形态。 细胞microRNA．192基因表达量的差异。 4 第3天对细胞增殖的影响。 中文摘要 验组(200nmol／L)。 6运用统计软件SPSS13．0对数据进行处理，采用单因素方差分析，以a =0．05为显著性差异标准。 结果： 1未经任何处理过的A375恶性黑色素瘤细胞呈梭形或多角形，分布均匀， 大小基本一致，增殖旺盛，核固缩现象较少见。 400nmol／L)转染效率在80％．90％之间。 3 瘤细胞并部分沉默microRNA．192基因。 4MTT比色分析法检测处理因素对A375恶性黑色素瘤细胞增殖的影响。 eTM2000对照组对 fP0．05)。3组实验组与正常细胞对照组和Lipofectamin 92抑制物浓度从 照均有明显差异fP0．05)，且随着microRNA．1 92抑制物(200nmol／L)转染 5用Anexin．v．PI双染色检测microRNA．1 48小时后对A375恶性黑色素瘤细胞后的早期凋亡率与照组有显著性差 异(P0．05)。 结论： 1 达的抑制效果明显。 2 殖凋亡，但其具体的作用机制需要进一步研究。 microRNA．192抑制物；细胞增殖；细胞凋亡 英文摘要 Effectof microRNA一192 on genesilencingproliferati ofA375 melanomacells malignant ABSTRACT Background： MicroRNA，an control a smallmolecule endogenousgene，Isnoncoding 22nuleotidesin aroleininhibit contains RNA，which eukaryotes，itplays ring thetranslationor of the targetgenebycombiningtargetgene．At degradation abouthowmicroRNAaffectthetumorisahot and present，thestudy