Nd3+和Sm3+对原代培养成骨细胞增殖、分化和矿化功能影响.pdfVIP

摘 要 摘 要 本实验采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、碱性磷酸酶(ALP)活性测定、油红 O 染色及 定量测定、矿化功能的测定以及实时定量 PCR(qPCR)等手段，在细胞和分子水平上研 究了Nd3+和 Sm3+对原代培养成骨细胞(OBs)增殖、分化和矿化功能的影响。研究结果表 明： 在测试浓度范围内，Nd3+和Sm3+抑制OBs 的增殖，而且Sm3+ 的抑制效应强于Nd3+ 。 3+ 3+ -5 Nd 和Sm 对OBs分化的影响是相似的，在1×10 mol/L 的浓度下均提高ALP 的活性，当 浓度为1×10-6 mol/L 时，ALP活性明显降低，随着浓度的降低，ALP活性逐渐升高，当浓 -8 -5 3+ 度为1×10 mol/L时，则转为促进OBs 的分化。浓度为1×10 mol/L 的Nd 促进矿化结节 -7 -6 3+ 的形成，而浓度为1×10 mol/L和1×10 mol/L 的Nd 抑制矿化结节的形成，进一步降低 浓度为1×10-8 mol/L ，则对矿化功能没有影响。在测试浓度范围内，Sm3+抑制OBs矿化结 3+ 3+ 3+ -7 -6 节的形成。Nd 和Sm 对OBs横向分化为脂肪细胞的影响是不同的，Sm (1×10 ，1×10 -5 3+ 和1×10 mol/L)促进 OBs横向分化为脂肪细胞，而Nd 则在测试浓度范围内抑制OBs横 向分化为脂肪细胞。进一步对成骨分化过程中相关基因Runt相关转录因子-2(Runx-2)和 -6 过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ) 的调控进行了研究。结果显示，浓度为1×10 mol/L 3+ 3+ -6 3+ 的Sm 和Nd 显著下调Runx-2 的mRNA 表达水平，浓度为 1×10 mol/L 的Nd 下调 PPAR-γ 的mRNA表达水平，但相同浓度的Sm3+则显著上调PPAR-γ 的mRNA表达水平。 上述研究结果提示：Nd3+和Sm3+对原代培养的OBs增殖、分化和矿化功能的影响依 赖浓度、培养时间和稀土离子的种类。这些结果对深入理解稀土离子对骨代谢的影响具 有重要的意义。 关键词 成骨细胞 增殖 分化 矿化 Ⅰ Abstract Abstract A series of methods including 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) method, alkaline phosphatase (ALP) activity measurement, Oil Red O stain and measurement, mineralized function and quantitative