表面微生物监测操作规程.docx

姓名Name部门/职务Department/Position签名Signature日期Date起草人Prepared by项金凤Xiang Jinfeng化验室Laboratory审核人Reviewed by包亚君Bao Yajun化验室主任Laboratory/ Director批准人Approved by张沛霞Zhang Peixia质量及法规管理中心/总监Quality Regulatory Affairs/Director生效日期Effective Date2015.06.01有效期Next review Date二年2017.05.31分发部门Distributed to档案室、质量部、化验室（2份）Archives, Quality Dept., Lab（Two copies）状态Status目的Purpose阐述洁净区表面微生物的检测方法，评估洁净区清洁规程的执行情况。范围Scope适用于洁净区的表面微生物的检查。职责Responsibility车间洁净区人员、化验室负责本规程的实施。程序Procedure采样位置4.1.1关键表面（与产品直接接触的表面）。根据设备内部构造进行确定，检测不易清洁/消毒的部位。4.1.2 一般表面（设备外表面、桌子、门、墙壁等）：不易清洁/消毒的部位至少取两个点；门正、反面各取一个点；门把手取一个点。4.1.3 地面：人员活动处至少取两点。4.1.4 人员手部（或手套）：左右手各一点。4.1.5 洁净工作服表面：帽子、门襟、前臂的袖管、肩前下部，至少取五个点。4.1.6 口罩外表面检测一个点4.2. 检测项目与频率4.2.1 车间D级洁净区(101车间、102车间、103车间、105车间)4.2.1.1 车间QA负责制定关键表面的清洁验证方案，根据设备的清洁特点，确定设备不易清洁、容易滋生微生物的部位，根据方案中的频次进行表面微生物的取样。4.2.1.2 化验室每月随机抽检一次正在使用的关键房间的一般表面微生物、地面微生物，确保全年覆盖每车间的所有关键房间。关键房间指用于产品在生产、包装过程中，有产品暴露在洁净区空气中的主要功能房间。关键房间在附件表格中列出。4.2.1.3 化验室每年随机抽取一次手部（或手套）接触产品的岗位的人员的手部（或手套）、洁净工作服和口罩的表面微生物。手部（或手套）接触产品的岗位在附件中列出。4.2.2 化验室菌检组A、C级洁净区4.2.2.1 化验室菌检组操作人员对C级洁净区每月随机分别抽检一次一般表面微生物和地面表面微生物。4.2.2.2 化验室菌检组A级洁净区操作人员，每月随机抽检一次洁净工作台、人员手部（或手套）、洁净服和口罩的表面微生物。4.3. 检测状态和时间一般为动态测试。取样宜在操作刚结束时进行取样。4.4. 检测方法4.4.1 接触碟法适用于监测光滑、平整的表面，如超净工作台、平整的设备表面、地面、操作者的衣服、操作者的手或手套等。4.4.1.1 接触碟的描述接触平板为具螺纹盖、直径55mm，内已注有无菌琼脂培养基，凝固后表面高于碟沿约2mm的培养皿。所用接触培养基为胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）培养基。4.4.1.2 采样采样时，旋开碟盖，将培养基表面用平均压力按在需采样的表面上约5秒，立即密封，做好标记。用70%的异丙醇擦拭被采样表面残留的培养基。4.4.1.3 培养将采样后的接触碟于30~35℃培养48~72h，点计菌落数并记录。4.4.2 表面擦拭法适用于监测不平整表面，如管路、角落等处；平整表面也适用。4.4.2.1 取样准备取样前，对脱脂棉签进行高压蒸汽灭菌，并根据采样量准备每支装有10ml或20 ml无菌生理盐水的试管灭菌。4.4.2.2 取样将高压灭菌的棉签用灭菌的生理盐水润湿，平稳而缓慢地擦拭取样表面。在向前移动的同时将其从一边移至另一边，翻转棉签，让棉签另一面也进行擦拭，另取一根棉签擦拭，方向与前次方向垂直。擦拭面积应达到100cm2。擦拭完后，用无菌剪刀将棉签头部剪下，投入生理盐水试管中。密闭。4.4.2.3检测充分混匀取样试管，吸取1ml样液，放入灭菌平皿内，倾注胰蛋白大豆琼脂（TSA）培养基。每个样品平行接种两个平皿，待凝固后，置30~35℃培养48~72h，计数平板上的菌落数。4.4.2.4计算物体表面菌落数（CFU/25cm2）=平板上平均菌落数×生理盐水体积棉签根数4.4.3 人员手（或手套）表面微生物取样4.4.3.1 接触碟法被检人员五指并拢，从手指尖处开始平均压力按在培养基表面上约5秒钟，立即密封，做好标记。用70%的异丙醇擦拭手表面，以除去琼脂残迹。将采样后的接触碟于30~35℃培养48~72h，点计菌落数并记录。4.5 表面微生物的规定4.5.1 表