补充内容一抗生素.ppt

Wishing?you? many?future?successes 补充内容一 抗生素 一、抗生素概念：微生物在代谢过程中产生的，在低浓度下就能抑制它种微生物的生长和活动，甚至杀死其他种微生物的化学物质。 补充：1、来源：也包括高等动、植物产生的代谢物，甚至包括化学合成或半合成的化合物。2、功能：也包括某些抗肿瘤、抗病毒、杀虫除草等物质。 三、抗生素的抗菌性能 1、选择性作用 抗菌谱：一种抗生素只对一定种类的微生物有抗菌作 用，即抗菌谱。 2、选择性毒力 抗生素对人体及动、植物组织的毒力，一般小于它对 致病菌的毒力，称为抗生素的选择性毒力。a-鹅膏蕈碱 3、引起细菌的耐药性 细菌在抗生素作用下，除了大批敏感菌被抑制或杀死以 外，常常会有一些菌株调整或改变代谢途径，从敏感菌变为 不敏感菌，即产生细菌的耐药性。 四、抗生素的抗菌作用机制 1、抑制核酸的合成 （1）与DNA结合，抑制DNA的复制和转录 放线菌素D、丝裂霉素C等。 （2）抑制转录起始、延伸 利福霉素、利福平等，与聚合酶β-亚基结合，阻断转录起始，另外利福霉素还具有阻断RNA链延伸功能 2、抑制蛋白质的合成 （1）抑制氨酰-tRNA的合成 吲哚霉素抑制色氨酰-tRNA的合成 （2）抑制蛋白质合成的起始 氨基环醇类抗生素链霉素，引起密码错读或抑制起始复合物的形成； （3）抑制肽链的延长 四环素类抗生素（金霉素、土霉素）封闭A位，氯霉素与50S亚基结合，环己亚胺与60S亚基结合，抑制肽酰转移酶的活性。 （4）抑制蛋白质合成的终止 嘌呤霉素具有α-氨基，可以与正在生长的肽链羧基形成肽键，并释放肽链。 3、改变细胞膜的通透性 多肽类抗生素具有表面活性剂的作用，能降低细菌细胞 膜的表面张力，从而改变了细胞膜的通透性，甚至破坏膜的 结构。 离子载体抗生素（转运离子抗生素）：某些抗生素如缬 氨霉素等是脂溶性物质，它们能结合并运载特定的阳离子通 过双脂层膜，很像膜系统上的离子载体，因此，称它们为离 子载体抗生素。 4、干扰细胞壁的形成 青霉素干扰细胞壁的形成主要是抑制粘肽合成 的最后一步，即转肽作用。 5、作用于能量代谢系统或作为抗代谢物 抗霉素A、寡霉素、短杆菌肽S抑制氧化磷酸化作用 五、细菌对抗生素耐药性的生物化学机制 1、耐药菌产生导致抗生素失效的酶 2、耐药菌改变对抗生素敏感的部位 例如：耐利福平菌株染色体突变，改变RNA聚合酶β-亚基， 使复制酶不能与抗生素结合。 3、耐药菌降低细胞透过抗生素的能力 （1）合成通透障碍物 （2）耐药菌基因突变影响通透系统 （3）产生转运抗生素的拮抗系统 补充内容二 生物化学技术 第一部分：蛋白质操作技术 一、蛋白质的透析 二、超滤 三、 AA纸层析 四、蛋白质凝胶层析、离子交换层析、亲和层析 五、蛋白质电泳技术 六、蛋白质免疫印迹实验 七、蛋白质的定量测定 八、蛋白质三维结构的测定 一、蛋白质的透析 透析膜是半透膜，蛋白质等大分子物质，它不能透过 透析膜，而小分子物质（无机盐、单糖等）可以自由通过透 析膜与周围的缓冲溶液进行溶质交换，进入到透析液中。 二、超滤 依赖于被分离物质分子的大 小、形状和性质的区别，在一定的 压力差下，水和小分子能通过具有 一定孔径的特制薄膜渗透过膜，而 大分子不能透过膜，从而使大小不 同的分子达到分离的目的。超滤是 脱盐、浓缩、生物大分子分离常用 的方法。 三、层析技术 层析（chromatography）：色谱。利用物质 的吸附能力、溶解能力、亲和力、阻滞作用等物理 性质不同对混合物进行分离分析的方法。 （一）AA纸层析（paper chromatography） 液-液相分配层析：纤维素吸附水为固定相，有机溶剂为流动相；分配系数=固定相浓度/流动相浓度；物质在固定相和流动中分配系数不同，则发生不断抽提从而在支持介质滤纸上分开；分配系数小，迁移速度快，Rf大，分配系数大则相反。 （二）蛋白质的凝胶过滤层析 凝胶具有网状结构，小分子物质能进入其内部，而大 分子物质却被排阻在外部，当一混合溶液通过凝胶过滤层析 住时，溶液中的物质就按照不同相对分子质量被分来了。 目前常用的凝胶有葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、琼脂 糖凝胶，其中最常用的是葡聚糖凝胶。 葡聚糖凝胶（Sephadex),它是葡萄糖通过α-1,6-糖苷 键形成的葡聚糖长链，与交